Биохимия. Березовская В.А. - 71 стр.

UptoLike

Составители: 

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
ПИРОВИНОГРАДНОЙ КИСЛОТЫ
1. ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Определить содержание пировиноградной кислоты (ПВК) в
биологических жидкостях.
2. ЗАДАНИЕ
2.1. Приготовить мышечный экстракт.
2.2. Получить безбелковый фильтрат.
2.3. Приготовить калибровочные растворы.
2.4. На фотоэлектроколориметре определить оптическую
плотность полученных растворов.
2.5. Построить калибровочный график и определить содер-
жание пировиноградной кислоты.
2.7. Сделать выводы и оформить отчет.
3. ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
Пировиноградная кислота (ПВК) является одним из важ-
нейших промежуточных продуктов углеводного обмена. До ста-
дии образования ПВК анаэробный и аэробный пути распада уг-
леводов совпадают. В анаэробных условиях ПВК является
конечным акцептором водорода. Под воздействием фермента
лактатдегидрогеназы ПВК взаимодействует с восстановленной
формой НАД (HAД · 2H), образовавшегося на этапе превращения
3-фосфоглицеринового альдегида в 1,3-дифосфоглицериновую
кислоту. При этом образуется молочная кислота и окисленная
форма НАД:
CH
3
CH
3
׀ ׀
C = O + HAД·2H
CHOH + НАД
׀ ׀
COOH COOH
ПВК молочная кислота
В аэробных условиях ПВК под влиянием пируватдегидроге-
назного комплекса (ТПФ, амидлипоевой кислоты, КоАSН, НАД,
71
          КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
           ПИРОВИНОГРАДНОЙ КИСЛОТЫ

                        1. ЦЕЛЬ РАБОТЫ
    Определить содержание пировиноградной кислоты (ПВК) в
биологических жидкостях.

                         2. ЗАДАНИЕ
    2.1. Приготовить мышечный экстракт.
    2.2. Получить безбелковый фильтрат.
    2.3. Приготовить калибровочные растворы.
    2.4. На фотоэлектроколориметре определить оптическую
плотность полученных растворов.
    2.5. Построить калибровочный график и определить содер-
жание пировиноградной кислоты.
    2.7. Сделать выводы и оформить отчет.

                  3. ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ ЧАСТЬ
    Пировиноградная кислота (ПВК) является одним из важ-
нейших промежуточных продуктов углеводного обмена. До ста-
дии образования ПВК анаэробный и аэробный пути распада уг-
леводов совпадают. В анаэробных условиях ПВК является
конечным акцептором водорода. Под воздействием фермента
лактатдегидрогеназы ПВК взаимодействует с восстановленной
формой НАД (HAД · 2H), образовавшегося на этапе превращения
3-фосфоглицеринового альдегида в 1,3-дифосфоглицериновую
кислоту. При этом образуется молочная кислота и окисленная
форма НАД:
              CH3                   CH3
              ‫׀‬                      ‫׀‬
              C = O + HAД·2H →       CHOH + НАД
              ‫׀‬                      ‫׀‬
              COOH                   COOH
                  ПВК          молочная кислота

    В аэробных условиях ПВК под влиянием пируватдегидроге-
назного комплекса (ТПФ, амидлипоевой кислоты, КоАSН, НАД,
                              71