Биохимия. Березовская В.А. - 8 стр.

UptoLike

Составители: 

К раствору белка не следует добавлять избыток реактива
Миллона, так как он содержит азотную кислоту, которая при
взаимодействии с белком может дать желтое окрашивание (ксан-
топротеиновая реакция), маскирующее реакцию Миллона. Для
ускорения появления окраски раствор можно подогреть.
Реакция Сакагучи идет с белками, которые содержат арги-
нин. В присутствии щелочи образуется розово-красное окраши-
вание с α-нафтолом. Аргинин имеет гуанидиновую группировку
(NH
2
CNH), которая в присутствии α-нафтола окисляется ги-
||
NH
побромидом в щелочной среде, в результате чего образуется про-
дукт конденсации розово-красного цвета.
Химизм реакции следующий:
аргинин
α-нафтол
продукт конденсации окисленного аргинина
с α-нафтолом розово-красного цвета
Белки, содержащие сульфгидрильные группы (–SH) можно
обнаружить при помощи нитропруссидной реакции и реакции
Фоля. Предварительно проводят щелочной гидролиз белка, при
котором отщепляется сульфидная группа, которую обнаружива-
ют при помощи тех или иных реактивов. При проведении нитро-
пруссидной реакции сульфидную группу открывают нитропрус-
сидом натрия. В результате его взаимодействия с ионом серы
окраска раствора изменяется на красно-фиолетовую.
При проведении реакции Фоля действуют плюмбитом натрия
(Na
2
PbO
2
), который образуется в результате взаимодействия аце-
тата свинца Pb(СН
3
СОО)
2
и гидроксида натрия NaOH, в результа-
те чего образуется черный нерастворимый осадок сульфида
свинца. Химизм реакции следующий:
8
    К раствору белка не следует добавлять избыток реактива
Миллона, так как он содержит азотную кислоту, которая при
взаимодействии с белком может дать желтое окрашивание (ксан-
топротеиновая реакция), маскирующее реакцию Миллона. Для
ускорения появления окраски раствор можно подогреть.
    Реакция Сакагучи идет с белками, которые содержат арги-
нин. В присутствии щелочи образуется розово-красное окраши-
вание с α-нафтолом. Аргинин имеет гуанидиновую группировку
(NH2−C−NH−), которая в присутствии α-нафтола окисляется ги-
      ||
    NH
побромидом в щелочной среде, в результате чего образуется про-
дукт конденсации розово-красного цвета.
    Химизм реакции следующий:




              α-нафтол
 аргинин


                          продукт конденсации окисленного аргинина
                          с α-нафтолом розово-красного цвета

    Белки, содержащие сульфгидрильные группы (–SH) можно
обнаружить при помощи нитропруссидной реакции и реакции
Фоля. Предварительно проводят щелочной гидролиз белка, при
котором отщепляется сульфидная группа, которую обнаружива-
ют при помощи тех или иных реактивов. При проведении нитро-
пруссидной реакции сульфидную группу открывают нитропрус-
сидом натрия. В результате его взаимодействия с ионом серы
окраска раствора изменяется на красно-фиолетовую.
    При проведении реакции Фоля действуют плюмбитом натрия
(Na2PbO2), который образуется в результате взаимодействия аце-
тата свинца Pb(СН3СОО)2 и гидроксида натрия NaOH, в результа-
те чего образуется черный нерастворимый осадок сульфида
свинца. Химизм реакции следующий:

                              8