Медицинская биохимия. Бескровная Е.В - 17 стр.

UptoLike

Рубрика: 

33
Способность веществ к адсорбции зависит от нескольких
факторов.
1) Строение вещества.
Введение в насыщенные углеводороды двойных связей и
особенно различных функциональных групп увеличивает их спо-
собность адсорбироваться. Адсорбционная способность функцио-
нальных групп увеличивается в следующем ряду:
СН=СН<ОСН
3
<СООR<C=O<CHO<SH<NH
2
<OH<COOH
2) Влияние полярности растворителя.
Лучше всего протекает адсорбция из неполярных растворите-
лей.
3) Стерическая доступность групп, способ-
ных к адсорбции.
Чем больше у молекулы мест контакта с поверхностью ад-
сорбента и чем они доступнее, тем лучше она адсорбируется.
Схема Шталя
При выборе подходящего сорбента и растворителя для ТСХ
удобно пользоваться схемой
Шталя.
активность
сорбента
полярный
неполярный
неполярные
полярные
Заштрихованный треугольник вращается вокруг центра.
Один угол устанавливается на разделяемое вещество (допустим,
неполярное), тогда два других угла укажут нам, что надо взять не-
полярный растворитель и активный сорбент (активность сорбента
легко регулируется добавками воды).
34
Для выбора растворителя нужной полярности пользуются
элюотропными рядами, где растворители расположены в порядке
увеличения их элюирующей способности (полярности), например:
гексан<гептан<CCl
4
<хлороформ<эфир<этилацетат<
ацетон<изопропанол <этанол<метанол<вода
Удобно регулировать полярность в двухкомпонентной систе-
ме растворителей, взятых из противоположных концов ряда, изме-
няя количество полярного компонента. Но следует помнить, что в
этом случае R
f
веществ будет зависеть от положения линии старта,
так как растворители, подобно растворенным в них веществам,
также разделяются в процессе хроматографии, образуя несколько
фронтов (
α
,
β
,
γ
, …), и на хроматограмме создается градиент их
концентрации.
При разделении методом TСХ очень важно работать в герме-
тичной камере, при полной насыщенности атмосферы парами рас-
творителя. В противном случае может иметь место так называемый
эффект фитилярастворитель с постоянной скоростью всасывается
сорбентом, но фронт, после достижения некоторого положения,
очень замедляет
свое движение, так как происходит интенсивное
испарение растворителя в атмосферу.
Определение R
f
ТСХ является двумерным неидеальным и неравновесным
хроматографическим процессом, который можно описать уравне-
нием, учитывающим распределение вещества в хроматографиче-
ской зоне при движении со скоростью v и размыванием зоны вдоль
и поперек направлению движения элюента. Скорость движения
хроматографической зоны v составляет определенную долю R
f
ско-
рости движения элюента u и зависит от коэффициента распределе-
ния K
d
вещества и соотношения объемов фаз V
н
/V
п
:
R
f
=v/u=1/(1+(V
н
/V
п
)K
d
). (2)
Величина R
f
характеризует подвижность хроматографических
зон в ТСХ и определяется экспериментально соотношением рас-
стояния X, пройденного веществом от точки нанесения пробы до
      Способность веществ к адсорбции зависит от нескольких               Для выбора растворителя нужной полярности пользуются
факторов.                                                           элюотропными рядами, где растворители расположены в порядке
      1) Строение вещества.                                         увеличения их элюирующей способности (полярности), например:
      Введение в насыщенные углеводороды двойных связей и                 гексан<гептан