Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 13 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ВСГУТУ | Улан-Удэ

Составители: 

Рубрика: 

теоретической тарелке N. Чем меньше N, тем выше
эффективность колонки. Качество разделения зависит также от
селективности системы сорбент—элюент.
На рис.2 указаны основные параметры, необходимые для
описания процесса жидкостной хроматографии (параметры
удерживания). Мерой оценки качества разделения служит
разрешение R между двумя соседними пиками.
В ВЭЖХ и газовой хроматографии используют понятие
«время удерживания t
уд
», в жидкостной хроматографии низкого
давления — понятие «объем элюции V
x
», но между ними нет
принципиальной разницы.
Значения ω
1
и ω
2
— длины отрезков между точками
пересечения двух касательных каждого пика с осью абсцисс;
тогда разрешение R определяется по формуле:
R = R
2,1
= 2(t
УД2
— t
УД1
)/( ω
1
+ ω
2
).
Разрешение R — величина безразмерная.
Взаимосвязь селективности и числа теоретических
тарелок при заданном разрешении показана в табл.5.
Разрешение R = 1, т.е. почти полное разделение двух соседних
пиков, может быть достигнуто в зависимости от селективности
системы при различном числе теоретических тарелок. При
низкой селективности (α = 1,01) необходима колонка на 165
000 теоретических тарелок. Если селективность системы
увеличивают путем оптимизации до α = 1,25, то для достижения
аналогичной эффективности достаточно всего 400
теоретических тарелок. Следовательно, для эффективности
разделения важнее не число теоретических тарелок, а
селективность системы. Численное значение ВЭТТ зависит от
условий элюирования и свойств разделяемых веществ.
Колонки для ВЭЖХ имеют 10 000 —40 000 теоретических
тарелок, а колонки для хроматографии низкого давления —
несколько сотен теоретических тарелок.
Рис. 2. Разрешение пиков и параметры
удерживания.
t
0
— время удерживания несорбируемого компонента;
t
уд
—полное время удерживания; t
УД2
и t
УД1
— время
удерживания компонентов 1 и 2; а
1
и а
2
— высота пиков; b
0,5
— ширина пика на половине высоты; ω
1
и ω
2
— ширина пиков у
основания.
Таблица 5. ЧИСЛО ТЕОРЕТИЧЕСКИХ ТАРЕЛОК,
НЕОБХОДИМОЕ ДЛЯ ДОСТИЖЕНИЯ РАЗРЕШЕНИЯ
R = 1 ПРИ РАЗЛИЧНОЙ СЕЛЕКТИВНОСТИ КОЛОНКИ
α
α N
э
фф
.
α N
э
фф
.
1,01
163 216
1,25
400
1,02
41056
1,50
144
1,05
7056
2,00
64
1,10
1036
теоретической тарелке N. Чем меньше N, тем выше
эффективность колонки. Качество разделения зависит также от
селективности системы сорбент—элюент.
     На рис.2 указаны основные параметры, необходимые для
описания процесса жидкостной хроматографии (параметры
удерживания). Мерой оценки качества разделения служит
разрешение R между двумя соседними пиками.
     В ВЭЖХ и газовой хроматографии используют понятие
«время удерживания tуд», в жидкостной хроматографии низкого
давления — понятие «объем элюции Vx», но между ними нет
принципиальной разницы.
     Значения ω1 и ω2 — длины отрезков между точками
пересечения двух касательных каждого пика с осью абсцисс;
тогда разрешение R определяется по формуле:
                                                                          Рис. 2. Разрешение пиков и параметры
              R = R2,1 = 2(tУД2 — t УД1)/( ω1 + ω2).               удерживания.
  Разрешение R — величина безразмерная.                              t0 — время удерживания несорбируемого компонента;
                                                               tуд —полное время удерживания; tУД2 и t УД1— время
     Взаимосвязь селективности и числа теоретических           удерживания компонентов 1 и 2; а1 и а2 — высота пиков; b0,5
тарелок при заданном разрешении показана в табл.5.             — ширина пика на половине высоты; ω1 и ω2— ширина пиков у
Разрешение R = 1, т.е. почти полное разделение двух соседних   основания.
пиков, может быть достигнуто в зависимости от селективности
системы при различном числе теоретических тарелок. При
низкой селективности (α = 1,01) необходима колонка на 165      Таблица 5. ЧИСЛО ТЕОРЕТИЧЕСКИХ ТАРЕЛОК,
000 теоретических тарелок. Если селективность системы          НЕОБХОДИМОЕ ДЛЯ ДОСТИЖЕНИЯ РАЗРЕШЕНИЯ
увеличивают путем оптимизации до α = 1,25, то для достижения   R = 1 ПРИ РАЗЛИЧНОЙ СЕЛЕКТИВНОСТИ КОЛОНКИ
аналогичной     эффективности     достаточно     всего   400   α
теоретических тарелок. Следовательно, для эффективности
разделения важнее не число теоретических тарелок, а                 α              Nэфф.           α              Nэфф.
селективность системы. Численное значение ВЭТТ зависит от          1,01           163 216         1,25            400
условий элюирования и свойств разделяемых веществ.
   Колонки для ВЭЖХ имеют 10 000 —40 000 теоретических             1,02           41056           1,50            144
тарелок, а колонки для хроматографии низкого давления —            1,05            7056           2,00             64
несколько сотен теоретических тарелок.                             1,10            1036

Страницы