Современные методы исследований в биохимии. Битуева А.В. - 29 стр.

                   ПРЕИМУЩЕСТВА МЕТОДА                               Определение можно проводить непосредственно в
      Полимеразная цепная реакция в настоящее время           клиническом материале (кровь, сыворотка, мокрота, слюна,
является наиболее совершенным диагностическим методом,        желудочный сок, биопсийный материал, мазки, смывы) и в
позволяющим выявлять единичные клетки возбудителей            материале, получаемом из объектов внешней среды (вода,
многих заболеваний за счет многократного увеличения           почва, пищевые продукты).
количества      копий      тестируемых       специфических
последовательностей ДНК.
      Тест-системы, основаны на принципе амплификации                       5.3. ПЦР в реальном времени.
ДНК, позволяет обнаруживать патогенные для человека
бактерии и вирусы даже в тех случаях, когда другими                На сегодня существует метод, превосходящий по своим
способами      (иммунологическим,      бактериологическим,    возможностям ПЦР - это метод ПЦР в реальном времени
микроскопическим) их выявление невозможно.                    (Real-Time PCR). Сущность метода заключается в
      Это преимущество достигается за счет:                   исследовании накопления продуктов амплификации с
      высокой чувствительности ПЦР - системы, которая         помощью специального прибора без последующего
составляет около 10- 1000 бактериальных клеток, в то время    электрофореза. Так как кинетика накопления продуктов
как       чувствительность        иммунологических       и    амплификации связана с исходным количеством матрицы,
микроскопических тестов колеблется в пределах 103-105         это дает возможность точно оценить её количество.
клеток;
      высокой специфичности ПЦР, обусловленной тем, что       Отличительными чертами данного метода являются
в   исследуемом     материале     выявляется    уникальный,
характерный только для данного возбудителя фрагмент ДНК.      - возможность количественного определения ДНК/РНК в
Специфичность задается нуклеотидной последовательностью       исследуемом материале,
праймеров, что исключает возможность получения ложных
результатов;                                                  - отсутствие стадии электрофореза,
      универсальности процедуры выявления различных
возбудителей;                                                 - менее строгие требования к организации ПЦР-лаборатории
      высокой скорости получения результатов анализа. Для
                                                              - автоматическая регистрация и интерпретация полученных
проведения ПЦР-анализа не требуется выделение и               результатов.
выращивание культуры возбудителя, что занимает большое
количество времени. Унифицированный метод обработки           Отсутствие стадии электрофореза позволяет минимизировать
биоматериала     и   детекции     продуктов    реакции,  и    риск контаминации продуктами ПЦР и таким образом резко
автоматизация процесса амплификации дают возможность          уменьшить число ложноположительных результатов.
провести полный анализ за 4-4,5 часа.                         Поскольку      регистрация    результатов     проводится
                                                              непосредственно в процессе ПЦР, весь анализ можно