Лекции по генетике человека. Буторина А.К - 27 стр.

                                   27




                 Пункция
                  или                          трансгеноз
                 резекция                       ex vivо




Рис. 3. Генно-инженерные подходы к лечению наследственных болезней
(по Бочкову, 1997).

      Под трансгенозом понимается процедура (или процесс) передачи
дополнительной чужеродной информации в клетку или организм. В
зависимости от способа введения экзогенных ДНК в геном пациента
генная терапия может проводиться либо в культуре клеток (ex vivo), либо
непосредственно в организме (in vivo). Для введения ДНК в клетки
млекопитающих апробированы многие подходы: химические (комплекс с
микропреципитатами         фосфата       кальция;     DEAE-декстран;
диметилсульфоксид; частицами золота); слияние клеток (протопластов);
физические (микроинъекции, электропорация, лазерная микроинъекция);
вирусные (ретровирусы, аденовирусы, аденоассоциированные вирусы).
Наиболее эффективными переносчиками ДНК в клетки являются
«природные шприцы» - вирусы.
      Трансгеноз ex vivo предполагает выделение и культивирование
специфических типов клеток пациента, введение в них чужеродных генов,
отбор трансфецированных клеток и реинфузия их тому же пациенту. В
настоящее время большинство допущенных к клиническим испытаниям
программ генной терапии использует именно этот подход. Осуществление
этих программ возможно лишь в крупных специализированных центрах,
требует больших материальных затрат и высоких биотехнологий.
      Трансгеноз in vivo осуществляется следующим образом. Создается
рекомбинантный генетический вектор с заданным геном, необходимым
для лечения (кольцевая молекула ДНК в виде фага или плазмиды,
составленная из двух и более отрезков ДНК разного происхождения).
Вектор может быть тканеспецифичным (органотропным) или
тканенеспецифическим. Его вводят в достаточном количестве. В клетках-
мишенях или в любых клетках происходит трансгеноз с помощью