Туляремия. Эпидемиология и профилактика. Чумаков М.Э. - 22 стр.

робов в исследуемом материале: при посеве слабо инфицированного ма-
териала рост отдельных колоний возможен в отдаленные сроки, поэтому
посевы следует выдерживать в термостате при 37°С в течение не менее 10
суток.
     Биологическая проба. Биологическая проба является самым чувст-
вительным способом обнаружения туляремийных бактерий в любом ис-
следуемом материале, в том числе и при исследовании материала от
больных людей, т.к. биопробные животные (белые мыши, морские свин-
ки) заболевают туляремией со смертельным исходом при подкожном вве-
дении единичных бактерий. Однако при обследовании больных людей да-
же биологический метод не всегда надежен, так как не в любом образце
материала, взятом от больного, имеются жизнеспособные туляремийные
бактерии. В отделяемом кожной язвы и в пунктате из пораженного лим-
фатического узла возбудитель туляремии может быть обнаружен в тече-
ние 3 недель от начала заболевания, редко позднее. Известны случаи вы-
деления возбудителя из мокроты, материала, взятого из зева (с миндалин)
или конъюнктивы глаза. В редких случаях удается выделить возбудитель
из крови, но обычно не позднее первой декады болезни.
     Патологический материал (отделяемое кожной язвы, конъюнктивы
глаза, миндалин или мокроту, пунктат из бубона) смешивают с неболь-
шим количеством физиологического раствора (0,3-0,5 мл) и вводят под-
кожно белой мыши или внутрибрюшинно морской свинке. Кровь для ис-
следования (3-5 мл) берут из локтевой вены, разводят пополам физиоло-
гическим раствором и вводят подкожно белым мышам (по 0,5- 1,0 мл) или
внутрибрюшинно морским свинкам (5-7 мл). Сроки гибели биопробных
животных зависят от степени инфицированности патологического мате-
риала и составляют 4-9 и более суток (до 15) для белых мышей и 6-15 (до
20) для морских свинок. Культуру туляремийных бактерий от биопробных
животных выделяют посевом на специальные питательные среды (см. вы-
ше). Идентификацию свежевыделенной туляремийной культуры осущест-
вляют на основании совокупности следующих признаков: 1) морфологии
клеток и грамотрицательной их окраски в мазках; 2) характера роста на
желточной среде или специальных средах; 3) отсутствие роста на простых
мясо-пептонных средах; 4) агглютинация туляремийной сывороткой; 5)
специфическим свечением в реакции иммунофлуоресценции; 6) способно-
стью вызывать гибель белых мышей и морских свинок при их заражении
испытуемой культурой с характерными для туляремии патологоанатоми-
ческими изменениями в органах и выделением чистой культуры возбуди-
теля.
     Реакция иммунофлуоресценции (РИФ), прямой метод. При иссле-
довании патологического материала от больных может быть эффективен
прямой иммунофлуоресцентный метод, позволяющий выявлять как жи-
вые, так и нежизнеспособные бактерии по свечению в них специфическо-
го антигена. Имеются данные, когда методом РИФ у больного туляремией
через 2 месяца от начала заболевания в мазках-отпечатках из бубона были
обнаружены туляремийные бактерии, тогда как выделение возбудителя
бактериологическими (биологическими) методами оказалось безуспеш-
ным. В качестве объектов, подвергающихся исследованию в РИФ, могут
быть мазки, приготовленные из патологического материала больного: со-
держимого кожного аффекта, пунктата бубона, отделяемого слизистой
глаза, смывы с зева миндалин и др.
     В качестве дополнительного метода диагностики туляремии у чело-
века может быть рекомендовано обнаружение специфической ДНК в па-
тологическом материале современным методом молекулярной биологии с
                                                                     22