Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 16 стр.

    При анализе навеску исследуемого материала в 5-20 г или больше (в
зависимости от содержания аскорбиновой кислоты) заливают в ступке 20
см3 1%-ной соляной кислоты и растирают до образования гомогенной мас-
сы. Процесс растирания не должен длиться больше 10 минут. При анализе
грубых тканей их растирают в присутствии 2-3 г (в зависимости от навес-
ки) хорошо промытого стеклянного песка, который берут по объему. По-
лученную массу сливают из ступки (через стеклянную палочку и воронку)
в мерную колбу на 100 см3. Ступку споласкивают несколько раз 10%-ной
щавелевой кислотой, которую выливают в ту же мерную колбу. Содержи-
мое колбы доводят до метки 1%-ной щавелевой кислотой и закрывают ее
пробкой, сильно встряхивают и оставляют стоять около 5 минут. Затем со-
держимое колбы выливают на сухой фильтр и отфильтровывают часть экс-
тракта (около 50 см3) в сухой стакан или колбу.
    Соляная кислота извлекает из растительной ткани как свободную, так и
связанную аскорбиновую кислоту. Щавелевая же кислота улучшает стой-
кость аскорбиновой кислоты в экстрактах.
    Для титрования вытяжек из полученного фильтрата пипеткой берут две
параллельные порции по 10-20 см3, наливают в стаканчик объемом 50 см3 и
титруют из микробюретки 0,001 н. раствором краски (2,6-дихлорфенолин-
дофенола) до появления явно-розового окрашивания, не исчезающего в те-
чение 0,5-1 минуты.
    Вытяжки из богатых аскорбиновой кислотой объектов можно с успе-
хом титровать из бюретки с делениями на 0,05 см3, и объемы вытяжек,
употребляемых для титрования, могут быть увеличены до 20 см3.
    Ввиду стойкости аскорбиновой кислоты в присутствии щавелевой ки-
слоты титрование готовых вытяжек при необходимости можно отложить
до следующего дня. При вычислении результатов вводят поправку и на ре-
активы.
    При необходимости произвести особо точные анализы следует принять
в расчет и другие вещества, которые могут реагировать с 2,6-
дихлорфенолиндофенолом. Для этого к другим двум порциям по 10 см3 ис-
следуемой вытяжки прибавляют 0,1 см3 10%-ного раствора сернокислой
меди и нагревают 10 минут при 110о С (на бане или в термостате) и после
охлаждения титруют краской. В присутствии меди и при нагревании ас-
корбиновая кислота полностью разрушается. Полученную поправку вычи-
тают из данных титрования опытных растворов.

     Определение аскорбиновой кислоты в окрашенных вытяжках



                                                                      15