Физиологические и биохимические методы анализа растений. Чупахин Г.Н. - 8 стр.

   С использованием показаний оптической плотности для растворов ДАК
разной концентрации, полученных с помощью фотоэлектроколориметра,
строится калибровочная кривая.
                             Литература
   1. Соколовский В.В., Лебедева Л.В., Лиэлуп Т.Б. О методе раздельного опре-
деления АК, ДАК, и дикетогулоновой кислот (ДКГК) в биологических тканях. //
Лабораторное дело. №3. 1974.

               КОЛОРИМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
                   АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ
                       (по Г.Н. Чупахиной)
    При количественном определении аскорбиновой кислоты в растениях
широко распространенным методом титрования растительных вытяжек
2,6-дихлорфенолиндофенолом имеются некоторые трудности, связанные с
определением конца титрования. Синяя краска 2,6-дихлорфенолиндофенол
восстанавливается в бесцветное соединение присутствующей в раститель-
ной вытяжке аскорбиновой кислотой (реакция Тильманса) таким образом,
что на одну молекулу аскорбиновой кислоты приходится две молекулы
краски. Избыток краски в кислой среде обусловливает розовое окрашива-
ние вытяжки, однако полученное окрашивание раствора нестабильно, ин-
тенсивность его все время уменьшается до полного исчезновения, поэтому
результат титрования во многом зависит от времени титрования.
    Предлогаемый нами метод основан на фотометрическом определении
избытка 2,6-дихлорфенолиндофенола после восстановления определенной
части его аскорбиновой кислотой. Оптическая плотность окрашенного рас-
твора измеряется с помощью фотоколориметра строго через 35 секунд по-
сле добавления в растительную вытяжку краски, что дает возможность
полностью исключить ошибки, возможные при титрационном определении
аскорбата.
                            Ход определения
    Для количественного определения восстановленной аскорбиновой ки-
слоты берется навеска свежего растительного материала – около 2 грам-
мов. Навеска измельчается ножницами из нержавеющей стали, так как сле-
ды тяжелых металлов способствуют окислению аскорбиновой кислоты.
Измельченный материал заливается 10 мл 2%-ной метафосфорной кисло-
ты и быстро растирается. Гомогенат количественно переносится в мерную
колбу на 100 мл, объем доводится до метки раствором 2%-ной метафос-
форной кислоты, которая является одним из лучших стабилизаторов ас-
корбиновой кислоты в растворе, к тому же она осаждает белки. Содержа-
ние колбы встряхивается, фильтруется или центрифугируется. Из фильтра-
                                                                            7