Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 33 стр.

                                     33
операция довольно длительная, поэтому осуществляется заранее
лаборантом.
     В настоящее время чаще используют готовый рыбо-пептонный агар
(РПА).
     Для культивирования почвенных микроорганизмов используют
среды, приготовленные на основе вытяжки из анализируемой почвы. В
качестве уплотнителя добавляют агар-агар или кремнезем SiO2.
     Питательные среды готовят обычно на водопроводной воде;
дистиллированной водой пользуются лишь при специальных
исследованиях, когда применяют строгие синтетические среды.
     Синтетические среды – среды строго определенного состава,
приготовленные из химических веществ. К ним иногда прибавляют
ничтожные количества витаминов, факторов роста или вытяжки из
природных продуктов для лучшего развития микроорганизмов. Так, для
выращивания бактерий почвы и воды пользуются, например, средой
Мейера. Ее состав: глюкоза – 1,0 г; виннокислый аммоний – 1,0 г; KNO3 –
0,5 г; NaCO – 0,5 г; K2HPO4 – 1,0 г; CaCl2 – 0,1 г; MgSO4.7H2O – 0,3 г; NaCl
– 0,1 г; FeCl3 – 0,01 г; агар-агар – 12,5 г; вода – 1000 мл.
     По назначению различают элективные и дифференциально-
диагностические среды. В практике микробиологических исследований
часто      пользуются       элективными        (накопительными)    средами,
предложенными впервые С.Н.Виноградским. Эти среды пригодны для
выращивания одного или группы родственных микроорганизмов и мало
пригодны или совсем непригодны для развития других. Элективные среды
применяются главным образом для выделения микроорганизмов из мест
их естественного обитания, где имеется много посторонних форм. В
качестве примера можно привести прием выращивания сенной палочки в
элективной среде. Сенная палочка (Bacillus subtilis) – аэробный,
спорообразующий вид бактерий. Чтобы добиться преимущественного
развития в сенном настое, где имеется масса разнообразных
микроорганизмов, именно сенной палочки, необходимо создать условия,
наиболее полно удовлетворяющие все потребности данного вида
микроорганизма: 1) обеспечить хорошую аэрацию среды; 2) удалить путем
кипячения микроорганизмы, не образующие спор; 3) снабдить культуру
необходимыми питательными веществами; 4) создать оптимальную для
роста и развития сенной палочки температуру (25-30оС). Порядок работы
по выращиванию сенной палочки в элективной среде: на технических
весах отвешивают 10-25 г сена, измельчают его ножницами и помещают в
колбу, заливают водопроводной водой (200 мл), добавляют щепотку мела
для нейтрализации среды и кипятят в течение 30 минут. При кипячении в
раствор переходят питательные вещества и отмирают неспоровые микробы
и значительная часть споровых; споры же сенной палочки выдерживают
кипячение на протяжении двух часов. Полученный отвар наливают в колбу
слоем не толще 1-2 см (для большего снабжения кислородом), закрывают
колбу ватной пробкой и помещают в термостат для инкубации. Через