ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
35
При пастеризации пробирки с жидкими средами помещают в
водяную баню . В контрольную пробирку с водой погружают термометр и
отсчет времени ведут с момента, когда термометр покажет нужную
температуру. Если эту операцию производят несколько раз с большими
интервалами времени (до суток), в течение которого споры успеют
прорасти, то достигается полная стерильность среды. Такой прием
стерилизации называется тиндализацией .
Методы холодной стерилизации применяются для тех питательных
сред, которые содержат в своем составе легко разлагающиеся вещества и
не выдерживают нагревания даже 100
о
С (сыворотки , антибиотики ,
белковые среды и т .п.). Такие среды стерилизуют следующими способами:
а) фильтрованием; б) с помощью антибиотиков.
Стерилизация фильтрованием основана на том, что малые поры
фильтра пропускают среду (раствор), но не пропускают микроорганизмов .
В качестве фильтров служат мелкопористые перегородки , асбестовые и
фарфоровые фильтры, а также особые бактериальные свечи,
изготовленные из глины, фарфора (фильтры Шамерляна). Широкое
распространение получили в последнее время фильтры Зейтца с
асбестовой пластинкой. Разливку сред после такой стерилизации
производят в стерильных условиях (в боксе ) в заранее
простерилизованную посуду.
Добавление антибиотиков применяется в тех случаях, когда желают
освободиться от одних групп микроорганизмов при сохранении других и
для уменьшения обсемененности материала. С этой целью к среде с
посевным материалом прибавляют растворенный антибиотик; таким
образом создается элективная среда.
Контроль стерильности сред (при любом способе стерилизации, кроме
последнего ) осуществляется так: разлитые среды оставляют на 3-4 дня при
25-27
о
С. В случае , если в них разовьются какие -либо микроорганизмы,
среду готовят и стерилизуют заново.
Задание :
1. Налить в 2 пробирки по 9 мл водопроводной воды.
2. Налить в 2 колбы по 99 мл водопроводной воды.
3. Приготовить следующие питательные среды: а) РПБ (7 пробирок по 20
мл); б) РПА (7 пробирок по 2/3 и 7 пробирок на 1/3 объема); в) РПЖ (7
пробирок на ½ объема); г) среда Гисса (7 пробирок); д) среда с
крахмалом (7 пробирок).
4. Приготовленные среды и воду простерилизовать.
Материалы и оборудование
На одну бригаду: 7 пробирок, 2 колбы на 100 мл, ватные пробки ,
марля, нитки , ножницы, линейка , мерный цилиндр на 100 мл, мерные
пипетки на 1 мл, стакан с водой. Колбы для приготовления сред (0,75 л) –
35 При пастеризации пробирки с жидкими средами помещают в водяную баню. В контрольную пробирку с водой погружают термометр и отсчет времени ведут с момента, когда термометр покажет нужную температуру. Если эту операцию производят несколько раз с большими интервалами времени (до суток), в течение которого споры успеют прорасти, то достигается полная стерильность среды. Такой прием стерилизации называется тиндализацией. Методы холодной стерилизации применяются для тех питательных сред, которые содержат в своем составе легко разлагающиеся вещества и не выдерживают нагревания даже 100оС (сыворотки, антибиотики, белковые среды и т.п.). Такие среды стерилизуют следующими способами: а) фильтрованием; б) с помощью антибиотиков. Стерилизация фильтрованием основана на том, что малые поры фильтра пропускают среду (раствор), но не пропускают микроорганизмов. В качестве фильтров служат мелкопористые перегородки, асбестовые и фарфоровые фильтры, а также особые бактериальные свечи, изготовленные из глины, фарфора (фильтры Шамерляна). Широкое распространение получили в последнее время фильтры Зейтца с асбестовой пластинкой. Разливку сред после такой стерилизации производят в стерильных условиях (в боксе) в заранее простерилизованную посуду. Добавление антибиотиков применяется в тех случаях, когда желают освободиться от одних групп микроорганизмов при сохранении других и для уменьшения обсемененности материала. С этой целью к среде с посевным материалом прибавляют растворенный антибиотик; таким образом создается элективная среда. Контроль стерильности сред (при любом способе стерилизации, кроме последнего) осуществляется так: разлитые среды оставляют на 3-4 дня при 25-27оС. В случае, если в них разовьются какие-либо микроорганизмы, среду готовят и стерилизуют заново. Задание: 1. Налить в 2 пробирки по 9 мл водопроводной воды. 2. Налить в 2 колбы по 99 мл водопроводной воды. 3. Приготовить следующие питательные среды: а) РПБ (7 пробирок по 20 мл); б) РПА (7 пробирок по 2/3 и 7 пробирок на 1/3 объема); в) РПЖ (7 пробирок на ½ объема); г) среда Гисса (7 пробирок); д) среда с крахмалом (7 пробирок). 4. Приготовленные среды и воду простерилизовать. Материалы и оборудование На одну бригаду: 7 пробирок, 2 колбы на 100 мл, ватные пробки, марля, нитки, ножницы, линейка, мерный цилиндр на 100 мл, мерные пипетки на 1 мл, стакан с водой. Колбы для приготовления сред (0,75 л) –
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 33
- 34
- 35
- 36
- 37
- …
- следующая ›
- последняя »