Морфология и культивирование микроорганизмов. Чурикова В.В - 39 стр.

                                  39
      ТЕМА 5. ЭКОЛОГИЯ                    МИКРООРГАНИЗМОВ

           Работа 11. Микробиологический анализ почвы

     Почва    –     наиболее   благоприятная    среда   для   развития
микроорганизмов. Этому способствует наличие питательных веществ,
влаги, защищенность от солнечного света. В 1 г почвы может содержаться
от нескольких миллионов до десятков миллиардов микробов.
     Существуют различные методы учета микроорганизмов. Основными
являются: 1. Метод прямого счета клеток микроорганизмов под
микроскопом: а) учет микробов в камере Гаряева; б) учет бактерий по
методу Виноградского - Шульгиной. 2. Учет микробов путем
культивирования. 3. Учет бактерий с помощью электронного микроскопа.
     Все эти методы имеют свои преимущества и недостатки и дают
относительные результаты. Так, методом прямого счета получают
завышенные результаты в связи с тем, то просчитываются живые и
мертвые клетки, разграничить их можно лишь с помощью
люминесцентной микроскопии. Еще более высокие цифры получают с
помощью электронного микроскопа, который позволяет просчитать
объекты, невидимые в световой микроскопии. Число живых клеток в
субстрате можно определить посевом на плотную питательную среду в
чашки Петри. На 3-й день проводят подсчет выросших колоний. При этом
исходят из того, что каждая колония образовалась в результате
размножения одной клетки. Данные, полученные этим способом,
оказываются чаще всего заниженными, поскольку универсальной среды,
благоприятной для развития всех бактерий, находящихся в посевном
материале, нет. В связи с этим микроорганизмы узкоспециализированные
(например, клетчатковые, нитрифицирующие бактерии) не будут расти на
эмпирических средах (МПБ, МПА, РПБ, РПА). Несмотря на отмеченный
недостаток, последний метод широко применяется для сравнительного
определения количества микроорганизмов в естественных субстратах, в
частности, в почве.
     Для микробиологического анализа исследуемого участка берут
среднюю пробу почвы (по диагонали участка в 4-5 точках) весом не менее
1 кг. Отбор проб проводят стерильным буром, лопатой или ножом в
стерильные полиэтиленовые мешки или стеклянные банки с корковыми
пробками. Анализ необходимо проводить в день взятия пробы. Хранение,
даже непродолжительное, может привести к изменениям в количественном
и качественном составе микроорганизмов. В случае острой необходимости
хранить образцы можно непродолжительное время в холодильнике при +4
+5оС. Параллельно с микробиологическим анализом проводят определение
содержания воды в пробе, так как конечный результат рассчитывают на 1 г
абсолютно сухой почвы.