ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
41
Схема разведения в 10000 раз:
1 г почвы + 99 мл воды → 100 мл (разведение 1:100)
1 мл + 9 мл воды 10 мл (разведение 1:1000)
1 мл + 9 мл воды 10 мл
(1:10000)
1 мл
(в чашку Петри).
В некоторых случаях заменяют два последних разведения (по 9 мл) на
одно в 99 мл Н
2
О (в колбе ).
Получив нужное разведение (в 10000-100000 раз и более), берут из
этого последнего разведения 1 мл почвенной болтушки и вносят в
стерильную чашку Петри. Затем в ту же чашку Петри выливают
стерильный расплавленный РПА, имеющий температуру не выше 45
о
С,
предварительно проведя горлышко пробирки через пламя спиртовки .
Осторожным круговым вращением чашки агар сразу же после его
внесения перемешивают с суспензией.
Этот способ посева в чашки Петри под питательную среду называется
глубинным. Чашки с застывшим агаром переворачивают вверх дном,
чтобы избежать попадания на поверхность агара конденсационной воды с
крышки , и помещают в термостат при 25
о
С, через несколько дней
подсчитывают количество выросших колоний и определяют, сколько
микробов содержалось в 1 г исследуемой почвы. Для этого число
выросших колоний умножают на степень разведения, например, на 10000.
Правила пересева:
1. Для каждой операции применяют новую пипетку (стерильную ).
2. Бумажные пакеты, в которые завернуты пипетки , вскрывают у верхнего
конца, не дотрагиваясь руками или какими-либо предметами до нижней
части пипетки .
3. Пробирки с водой открывают на минимальное время, необходимое для
того , чтобы набрать или внести нужное количество жидкости, причем
пробирку в этот момент держат не вертикально, а наклонно.
4. Ватные пробки на стол не кладут , а держат их за верхнюю часть
пальцами правой руки : перед закрыванием пробирки пробку проводят
через пламя спиртовки (если вата загорится, погасить ее, закрывая
ладонью ).
5. Содержимое пробирки , закрытой ватной пробкой, перемешивают, не
смачивая пробку ; это достигается путем простукивания пробиркой по
ладони руки .
Очень важным моментом работы по определению численности
микроорганизмов в субстрате является учет выросших колоний. Колонии
бактерий подсчитывают обычно через 3, колонии грибов и дрожжей –
через 5-7, а колонии актиномицетов – через 5-15 суток инкубации. Работу
проводят , не открывая чашек Петри. Для этого чашки Петри
просматривают в проходящем свете и просчитанные колонии отмечают
чернилами или тушью на наружной стороне дна чашки Петри.
41 Схема разведения в 10000 раз: 1 г почвы + 99 мл воды → 100 мл (разведение 1:100) 1 мл + 9 мл воды 10 мл (разведение 1:1000) 1 мл + 9 мл воды 10 мл (1:10000) 1 мл (в чашку Петри). В некоторых случаях заменяют два последних разведения (по 9 мл) на одно в 99 мл Н2О (в колбе). Получив нужное разведение (в 10000-100000 раз и более), берут из этого последнего разведения 1 мл почвенной болтушки и вносят в стерильную чашку Петри. Затем в ту же чашку Петри выливают стерильный расплавленный РПА, имеющий температуру не выше 45оС, предварительно проведя горлышко пробирки через пламя спиртовки. Осторожным круговым вращением чашки агар сразу же после его внесения перемешивают с суспензией. Этот способ посева в чашки Петри под питательную среду называется глубинным. Чашки с застывшим агаром переворачивают вверх дном, чтобы избежать попадания на поверхность агара конденсационной воды с крышки, и помещают в термостат при 25оС, через несколько дней подсчитывают количество выросших колоний и определяют, сколько микробов содержалось в 1 г исследуемой почвы. Для этого число выросших колоний умножают на степень разведения, например, на 10000. Правила пересева: 1. Для каждой операции применяют новую пипетку (стерильную). 2. Бумажные пакеты, в которые завернуты пипетки, вскрывают у верхнего конца, не дотрагиваясь руками или какими-либо предметами до нижней части пипетки. 3. Пробирки с водой открывают на минимальное время, необходимое для того, чтобы набрать или внести нужное количество жидкости, причем пробирку в этот момент держат не вертикально, а наклонно. 4. Ватные пробки на стол не кладут, а держат их за верхнюю часть пальцами правой руки: перед закрыванием пробирки пробку проводят через пламя спиртовки (если вата загорится, погасить ее, закрывая ладонью). 5. Содержимое пробирки, закрытой ватной пробкой, перемешивают, не смачивая пробку; это достигается путем простукивания пробиркой по ладони руки. Очень важным моментом работы по определению численности микроорганизмов в субстрате является учет выросших колоний. Колонии бактерий подсчитывают обычно через 3, колонии грибов и дрожжей – через 5-7, а колонии актиномицетов – через 5-15 суток инкубации. Работу проводят, не открывая чашек Петри. Для этого чашки Петри просматривают в проходящем свете и просчитанные колонии отмечают чернилами или тушью на наружной стороне дна чашки Петри.
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 39
- 40
- 41
- 42
- 43
- …
- следующая ›
- последняя »