Методические указания к самостоятельной работе и лабораторному практикуму по физической химии "Хроматографические методы анализа". Цыренова С.Б - 31 стр.

няют под вакуумом на роторном испарителе при температуре не выше 25-30 град. С. Сухой
неомыляемый осадок немедленно растворяют в объеме растворителя так, чтобы концентра-
ция витамина А была в пределах 3-5 мкг/см3.
       В колонку хроматографа вводят последовательно равные объемы (0,01-0,1 см3) испы-
туемого раствора, полученного выше описанным методом, и стандартного. Пик витамина на
хроматограмме испытуемого раствора индентифицируют с пиком витамина на хромато-
грамме стандартного раствора. Содержание витамина определяют по результатам двух хро-
матографических анализов.
       Содержание витамина А в продукте (мг/100г) рассчитывают по формуле
                                                    Н С V ⋅ 100
                                               Х = ис ст 1
                                                     Н стV2 а ⋅ 100
       где Нис - средняя высота (или площадь) пика витамина А на хроматограмме пробы ис-
пытуемого раствора, мм (или мм2); Нст - средняя высота (или площадь) пика витамина А на
хроматограмме стандартного раствора, мм или мм2; Сст - масса витамина А в стандартном
растворе, введенном в колонку, мкг; V1 - общий объем испытуемого раствора, см3; V2 - объ-
ем испытуемого раствора, вводимый в колонку хроматографа, см3; а - навеска образца про-
дукта, г; 100 - пересчет на 100 г продукта; 1000 - пересчет на мг.
       При использовании в качестве стандарта ретинола ацетата в формуле будут те же обо-
значения, кроме
       Нст =Нис + ст - Нмс, где Нис + ст - средняя высота (или площадь) пика витамина А в образ-
це с внесенным ретинола ацетатом; Сст - масса витамина А в стандартном растворе с внесен-
ным ретинола ацетатом (мкг), введенного в колонку.
       Результаты определений рассчитываются до третьей значащей цифры.
       За результат измерений принимают среднее арифметическое значение результатов
двух параллельных определений.
       Приготовление реактива (стандартного раствора). Взвешивают 0,02 г витамина А или
0.025 г ретинола ацетата с точность до 0,0001 г, растворяют в этиловом спирте и доводят
объем в мерной колбе до 100 см3 (основной стандартный раствор). 2 см3 раствора переносят
в мерную колбу на 100 см3 и доводят объем этиловым спиртом (рабочий стандартный рас-
твор). Содержание витамина А в рабочем стандартном растворе в пересчете на ретинол при-
близительно 4-4,5 мкг/см3 (13-15 МЕ/см3).
       При использовании в качестве стандартного раствора ретинола ацетата в масле навес-
ку препарата рассчитывают, исходя из требуемой концентрации рабочего раствора.
       Стандартный раствор хранят при 4 град. С в течение 10 дней. В день использования
определяют концентрацию в рабочем стандартном растворе, измеряя оптическую плотность
раствора на спектрофотометре при длине волны 325 нм в кювете толщиной 1 см и проверяя
чистоту стандартного раствора хроматографически (на хроматограмме должен присутство-
вать один пик витамина, помимо пиков, не удерживаемых на колонке примесей, содержа-
щихся в растворителе). Содержание витамина А (мкг/см3) рассчитывают по формуле
                                                        D ⋅ 10000
                                                 ХА =
                                                             Е
       где D - оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 325 нм против
этилового спирта; 10000 - содержание витамина А в 1 см3 1%-ного раствора, мкг; Е - 1830
для витамина А при использовании кюветы толщиной 1 см.
       При использовании в качестве стандарта ретинола ацетата содержание в растворе пе-
ресчитывают на витамин А (ретинол) по формуле
                                                    D ⋅ 10000 ⋅ 0.87
                                              ХА =
                                                             Е
       где Е - 1550 для ретинола ацетата при использовании кюветы толщиной 1 см; 0,87 -
коэффициент пересчета на витамин А.