Общая биотехнология. Данилова Т.Е - 10 стр.

UptoLike

Рубрика: 

18
F
1
активного продуцента разнообразного комплекса
гидролитических ферментов.
План работы
1. Приготовление посевного материла.
2. Подготовка посуды к стерилизации.
3. Приготовление заданного варианта среды.
4. Определение насыпного веса
5. Подготовка среды к стерилизации.
6. Определение влажности среды.
Для регистрации результатов работы формируется
нижеприведенный журнал наблюдения.
Влага, Вар
иант
Р А
ср
Насы
пной
вес,ρ
н
а
В
n
m
б
m
1
m
2
W
исх
1.Приготовление посевного материала
За 3-4 дня до начала занятия делается пересев
продуцента с музейной пробирки на свежескошенный
сусло-агар. Посевы на косом сусловом агаре помещаются
в термостат с температурой 30
о
С на 3-4 суток. Рост гриба
заканчивается обильным спороношением. На первом
занятии производится пересев продуцента с пробирок на
твердую питательную среду (пшеничные отруби). Для
осуществления этого пересева в конические колбы
емкостью 250 мл раскладывают по 15 г пшеничных
отрубей с влажностью 45%. Колбы со средой
стерилизуются в автоклаве при давлении 1 ати в течение
часа. Охлажденные до температуры 40
о
С отруби в
стерильных условиях засевают суспензией спор плесневого
гриба. Суспензию спор получают смывом спороносящей
19
культуры продуцента с косого сусла-агара 5 мл стерильной
воды. На каждую колбу со стерильной средой вносится вся
суспензия спор. После тщательного перемешивания колбы
с засеянной средой ставятся в термостат с температурой
30
о
С на 2-3 суток. После 48-72 часов роста мицелий гриба
полностью пронизывает питательную среду, образуется
рыхлый корж густо покрытый конидиями гриба желто-
зеленого цвета. Эта культура на отрубях, выращенная в
колбах, является исходным посевным материалом для
последующего лабораторного занятия.
2.Подготовка посуды к стерилизации
Вся посуда перед стерилизацией должна быть
тщательно вымыта и высушена.
Перед подготовкой посуды к стерилизации необходимо
кювету вместе с крышкой и листом непроклееной бумаги
взвесить и записать этот вес в журнал наблюдений (Р).
Далее следует завернуть в бумагу, не нарушая ее
целостности и аккуратно завязать веревочками следующие
предметы: 1) кювету; 2) крышку к кювете вместе с
вырезанным по размерам крышки листом непроклееной
бумаги; 3) сосуд емкостью 1,5-2 литра для увлажнения
среды и ее засева; 4) мерный цилиндр на 250 мл для
дозировки стерильной воды; 5) стеклянную палочку для
перемешивания посевной культуры; 6) колбу (емкостью
500 мл с 250 мл водопроводной воды.
Стерилизацию следует проводить в автоклаве при 1 ати
в течение 30 минут.
Стерильная посуда после стерилизации должна быть
подсушена в сушильном шкафу при 105
о
С, т.к. бумага при
стерилизации слегка увлажняется.
F1 – активного продуцента разнообразного комплекса           культуры продуцента с косого сусла-агара 5 мл стерильной
гидролитических ферментов.                                   воды. На каждую колбу со стерильной средой вносится вся
                                                             суспензия спор. После тщательного перемешивания колбы
                План работы                                  с засеянной средой ставятся в термостат с температурой
1.   Приготовление посевного материла.                       30оС на 2-3 суток. После 48-72 часов роста мицелий гриба
2.   Подготовка посуды к стерилизации.                       полностью пронизывает питательную среду, образуется
3.   Приготовление заданного варианта среды.                 рыхлый корж густо покрытый конидиями гриба желто-
4.   Определение насыпного веса                              зеленого цвета. Эта культура на отрубях, выращенная в
5.   Подготовка среды к стерилизации.                        колбах, является исходным посевным материалом для
6.   Определение влажности среды.                            последующего лабораторного занятия.

                                                                       2.Подготовка посуды к стерилизации
       Для регистрации результатов работы формируется           Вся посуда перед стерилизацией должна быть
     нижеприведенный журнал наблюдения.                      тщательно вымыта и высушена.
                                                                Перед подготовкой посуды к стерилизации необходимо
 Вар    Р   Аср   Насы     а                 Влага,          кювету вместе с крышкой и листом непроклееной бумаги
 иант             пной          В   n   mб    m1 m2   Wисх   взвесить и записать этот вес в журнал наблюдений (Р).
                  вес,ρн                                     Далее следует завернуть в бумагу, не нарушая ее
                                                             целостности и аккуратно завязать веревочками следующие
                                                             предметы: 1) кювету; 2) крышку к кювете вместе с
                 1.Приготовление посевного материала         вырезанным по размерам крышки листом непроклееной
   За 3-4 дня до начала занятия делается пересев             бумаги; 3) сосуд емкостью 1,5-2 литра для увлажнения
продуцента с музейной пробирки на свежескошенный             среды и ее засева; 4) мерный цилиндр на 250 мл для
сусло-агар. Посевы на косом сусловом агаре помещаются        дозировки стерильной воды; 5) стеклянную палочку для
в термостат с температурой 30оС на 3-4 суток. Рост гриба     перемешивания посевной культуры; 6) колбу (емкостью
заканчивается обильным спороношением. На первом              500 мл с 250 мл водопроводной воды.
занятии производится пересев продуцента с пробирок на           Стерилизацию следует проводить в автоклаве при 1 ати
твердую питательную среду (пшеничные отруби). Для            в течение 30 минут.
осуществления этого пересева в конические колбы                 Стерильная посуда после стерилизации должна быть
емкостью 250 мл раскладывают по 15 г пшеничных               подсушена в сушильном шкафу при 105оС, т.к. бумага при
отрубей с влажностью 45%. Колбы со средой                    стерилизации слегка увлажняется.
стерилизуются в автоклаве при давлении 1 ати в течение
часа. Охлажденные до температуры 40оС отруби в
стерильных условиях засевают суспензией спор плесневого
гриба. Суспензию спор получают смывом спороносящей
                               18                                                       19