Общая биотехнология. Данилова Т.Е - 15 стр.

UptoLike

Рубрика: 

28
относительная влажность его 100%. От сильной аэрации
культура слегка подсыхает.
3. Стадия третья,
продолжающаяся с 18-21 час. до
момента начала спорообразования. Этот период принято
связывать с моментом наиболее интенсивного образования
в культуре ферментов, накопление которых в основном
завершается и достигает максимума как правило в начале
спорообразования. В этот период тепла выделяется меньше
от 30 до 15 ккал/кг культуры за 1 час. Эту стадию принято
называть стадией «ферментации». Аэрация культуры не
превышает 20-25 объемов на 1 объем камеры за 1 час.
Выращенная поверхностным способом культура гриба
Aspergillus oryzae 8F
1
является исходным материалом для
следующего занятия.
3. Определение содержания крахмала
Сущность метода заключается в способности крахмала,
растворенного в разбавленной кислоте, давать оптически
активные растворы, изменяющие угол вращения плоскости
поляризованного луча света.[29]
Материалы и оборудование:
Среда заданного состава 5
г., технические весы, мерная колба на 100 мл, водяная
баня, сахариметр, HCl 1,124%, фосфорно-вольфрамовая
кислота 4%, этиловый эфир, дистиллированная вода.
Ход работы
Взвешивают 5 г питательной среды на технических
весах до сотых долей грамма. Навеску пересыпают в сухую
мерную колбу на 100 мл.
Реактивы Количество, мл
Соляная кислота, 1,124% р-р
(0)
25
Перемешивание
Соляная кислота, 1,124% р-р 25
Выдержка на кипящей водяной бане, 15 мин
(1)
29
Холодная дистиллированная.вода 15
Охлаждение до 20
0
С
Фосфорно-вольфрамовая кислота,
4% раствор
10
Выдержка 20 мин
Этиловый эфир 1-2 капли
Дистиллированная вода До 100
Фильтрование
(2)
Отсчет показаний сахариметра
(3)
Примечание: (0) – 26,6 мл ρ=1,19 г/мл или 40 мл ρ=1,125
г/мл довести до 1 л дист. водой.
(1)В течение первых трех минут, не вынимая колбы из
бани, размешивают ее содержимое плавными круговыми
движениями. Необходимо, чтобы вода в бане покрывала
всю широкую часть колбы и непрерывно кипела.
(2)Первые порции фильтрата возвращают в воронку.
Фильтратом наполняют поляризационную трубку и сразу
же делают первый отсчет.
(3) - Отсчет показаний сахариметра должен быть сделан
быстро, чтобы избежать неправильных результатов
определения. По трем отсчетом вычисляют среднее
арифметическое. Расхождение между крайними
значениями результатов отсчета не должна превышать 0,1
о
шкалы.
Содержание крахмала (Х,%) в каждой навеске среды в
пересчете на абсолютное сухое вещество вычисляют по
формуле:
Х =
q
aK
100
100
,
где Кпереводной коэффициент, равный (при длине
трубки сахариметра 200 мл) для пшеницы – 1,898.
апоказания сахариметра в градусах шкалы
q – влажность среды, %.
относительная влажность его 100%. От сильной аэрации         Холодная дистиллированная.вода                   15
культура слегка подсыхает.                                                        Охлаждение до 200С
   3. Стадия третья, продолжающаяся с 18-21 час. до          Фосфорно-вольфрамовая кислота,                  10
момента начала спорообразования. Этот период принято         4% раствор
связывать с моментом наиболее интенсивного образования       Выдержка 20 мин
в культуре ферментов, накопление которых в основном          Этиловый эфир                             1-2 капли
завершается и достигает максимума как правило в начале       Дистиллированная вода                      До 100
спорообразования. В этот период тепла выделяется меньше                              Фильтрование (2)
от 30 до 15 ккал/кг культуры за 1 час. Эту стадию принято                  Отсчет показаний сахариметра (3)
называть стадией «ферментации». Аэрация культуры не         Примечание: (0) – 26,6 мл ρ=1,19 г/мл или 40 мл ρ=1,125
превышает 20-25 объемов на 1 объем камеры за 1 час.         г/мл довести до 1 л дист. водой.
   Выращенная поверхностным способом культура гриба         (1) – В течение первых трех минут, не вынимая колбы из
Aspergillus oryzae 8F1 является исходным материалом для     бани, размешивают ее содержимое плавными круговыми
следующего занятия.                                         движениями. Необходимо, чтобы вода в бане покрывала
                                                            всю широкую часть колбы и непрерывно кипела.
          3. Определение содержания крахмала                (2) – Первые порции фильтрата возвращают в воронку.
    Сущность метода заключается в способности крахмала,     Фильтратом наполняют поляризационную трубку и сразу
растворенного в разбавленной кислоте, давать оптически      же делают первый отсчет.
активные растворы, изменяющие угол вращения плоскости       (3) - Отсчет показаний сахариметра должен быть сделан
поляризованного луча света.[29]                             быстро, чтобы избежать неправильных результатов
    Материалы и оборудование: Среда заданного состава 5     определения. По трем отсчетом вычисляют среднее
г., технические весы, мерная колба на 100 мл, водяная       арифметическое.      Расхождение     между      крайними
баня, сахариметр, HCl 1,124%, фосфорно-вольфрамовая         значениями результатов отсчета не должна превышать 0,1о
кислота 4%, этиловый эфир, дистиллированная вода.           шкалы.
Ход работы
    Взвешивают 5 г питательной среды на технических            Содержание крахмала (Х,%) в каждой навеске среды в
весах до сотых долей грамма. Навеску пересыпают в сухую     пересчете на абсолютное сухое вещество вычисляют по
мерную колбу на 100 мл.                                     формуле:
                                                                                     K • a • 100
      Реактивы                     Количество, мл                                Х=              ,
 Соляная кислота, 1,124% р-р (0)              25                                      100 − q
                   Перемешивание                              где К – переводной коэффициент, равный (при длине
 Соляная кислота, 1,124% р-р                  25            трубки сахариметра 200 мл) для пшеницы – 1,898.
       Выдержка на кипящей водяной бане, 15 мин (1)               а – показания сахариметра в градусах шкалы
                                                                  q – влажность среды, %.
                           28                                                          29