Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 22 стр.

                                                            20

   Температура культивирования 32-34оС, длительность             Для регистрации результатов работы формируется ниже-
культивирования 7 суток.                                         приведенный журнал наблюдения.
   В процессе роста гриба на поверхности питательной                                                        Таблица 1
среды образуется мощная сильно складчатая пленка с хо-             № ва- рН           фермен- %        сухих % РВ
рошо развитой поверхностью. Лимонная кислота, синтези-             рианта тационной. среды     веществ
руемая грибом, концентрируется под его пленкой. Культу-
ральная жидкость сливается. В производстве пленку ис-
пользуют вторично, свежая питательная среда должна быть                    1. Подготовка посуды для стерилизации
менее концентрированной, чем первая. После второго съема         Посуда и материалы: стаканы емкостью 700-800 мл и пло-
культуральной жидкости пленку обрабатывают острым па-            щадью дна – 0,4 дм3, вата, марля, исходный посевной мате-
ром или направляют для выделения из нее пектолитических          риал, фильтры бумажные, мерная колба на 50 мл, индика-
ферментов. Разработаны варианты технологии, предусмат-           торная универсальная бумага, воронка, коническая колба на
ривающие одновременное получение лимонной кислоты и              250 мл, 1%-ные растворы: NH4Cl, КH2PO4, ZnSO4; 10%-
пектолитических ферментов. Для поверхностного культи-            ный р-р K4[Fe(CN)6]; глюкоза кристаллическая, сахароза
вирования используют гриб Asp. niger штамм 119.                  кристаллическая, разбавленный р-р мелассы, мерные ци-
   Цель работы: культивирование плесневого гриба Asp.            линдры на 500 мл, 100 мл, пипетки на 10 мл, 5 мл, кониче-
niger на жидкой питательной среде поверхностным спосо-           ские колбы на 500 мл, 5%-ный раствор HCl, насыщенный
бом для получения лимонной кислоты.                              раствор Na2CO3, раствор I2, реактив Фелинга А, реактив Фе-
   Лабораторная работа рассчитана на 18 академических            линга Б, дистиллированная вода, сернокислое железо в сер-
часов и выполняется на 3-х занятиях.                             ной кислоте, 0,1 н перманганат калия.
                                                                 Оборудование: термостат, рН-метр, рефрактометр, водяная
                     Первое занятие                              баня, электроплитка, бюретка.
                                                                    Стаканы емк. 700-800 мл моются, насухо вытираются и
                        План работы                              закрываются ватномарлевыми салфетками. Салфетки изго-
   1.   Подготовка посуды для стерилизации.                      тавливаются из ватного «полотна», для этого отделяется
   2.   Приготовление питательной среды и ее стерилиза-          слой ваты в 2-3 см по возможности равномерный по толщи-
        ция.                                                     не и из него ножницами вырезается круг диаметром 17-18
   3.   Определение концентрации сухих веществ в исход-          см. Круг ваты покрывается с двух сторон двумя слоями
        ной среде.                                               марли и простегивается квадратами 2х2 см. Салфетка долж-
   4.   Определение рН среды.                                    на быть либо привязана бечевкой, либо схвачена резинкой.
   5.   Определение содержания сахара в среде.                      На каждый вариант опыта заготавливается по два стака-
   6.   Засев стерильной среды спорами продуцента, харак-        на. Закрытые стаканы загружаются в автоклав и стерилизу-
        теристика условий культивирования.                       ются 30 мин при 0,5 ати.