Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 23 стр.

                                                             21

2.Приготовление питательной среды и ее стерилизация
   Варианты сред для культивирования гриба Asp. niger                                                                                                                                 Таблица 2
штамм 119 представлены в табл.2.
   Обычно исходный раствор мелассы готовится сразу для
всех вариантов, в состав которых входит этот компонент.




                                                                                                                              Н2О
                                                                                                                              Кол




                                                                                                                                                                              9,5




                                                                                                                                                                                                    9,5
                                                                                                                                                        2

                                                                                                                                                               5

                                                                                                                                                                      8



                                                                                                                                                                                      2

                                                                                                                                                                                             5
   1,2 кг мелассы заливают 2000 мл кипящей водопровод-




                                                                                                                                                 -
                                                                  Количество мл добавляемых
ной воды, доводят этот раствор до кипения и кипятят 10




                                                                                                                   K4Fe[(CN)6]
мин. Из этого раствора берут пробу и определяют в ней рН




                                                                                                                   10% р-р
потенциометрическим методом. Для приготовления среды




                                                                  солевых растворов




                                                                                                                                                                              0,5




                                                                                                                                                                                                    0,5
рН раствора мелассы должен быть 7,0 , так как рН=8 задер-




                                                                                                                                                 10

                                                                                                                                                        8

                                                                                                                                                               5

                                                                                                                                                                      2



                                                                                                                                                                                      8

                                                                                                                                                                                             5
живает прорастание спор, а при рН= 5-4,5 они совсем не




                                                                                                                          соот-
                                                                                                                   добавляется
прорастают.




                                                                                                                   ношении
                                                                                                                   КH2PO4:
   В зависимости от того, какое было рН раствора мелассы,




                                                                                                                   NH4Cl:
                                                                                                                   1% р-р


                                                                                                                   ZnSO4



                                                                                                                                         1:1:1
его либо подщелачивают содой, либо подкисляют 1н




                                                                                                                                                 4,5

                                                                                                                                                        4,5

                                                                                                                                                               4,5

                                                                                                                                                                      4,5

                                                                                                                                                                              4,5

                                                                                                                                                                                      4,5

                                                                                                                                                                                             4,5

                                                                                                                                                                                                    4,5
                                                                                                                   в
Н2SO4.
   Для того, чтобы не ошибиться, берут 100 г разбавленного




                                                                                                                                 вари-




                                                                                                                                                                                                    136,0
                                                                                                                                                                                      27,2

                                                                                                                                                                                             68,0
раствора мелассы, определяют ее рН и если она щелочная,




                                                                                                                                 г на

                                                                                                                                 ант


                                                                                                                                                 -

                                                                                                                                                        -

                                                                                                                                                               -

                                                                                                                                                                      -

                                                                                                                                                                              -
то потенциометрически оттитровывают ее из бюретки 1н




                                                                                                                   глюкоза
Н2SO4.. Если меласса кислая, то берут определенное весовое




                                                                  Наименование и содержание источника углерода в
количество соды (NaHCO3) и добавляют ее до устойчивого




                                                                                                                                                                                                    17,0
                                                                                                                                                                                      3,4

                                                                                                                                                                                             8,5
                                                                                                                                 %
рН – 7,0. Остаток неизрасходованной соды взвешивают и по




                                                                                                                                                 -

                                                                                                                                                        -

                                                                                                                                                               -

                                                                                                                                                                      -

                                                                                                                                                                              -
разнице определяют ее количество, необходимое для ней-
трализации кислой мелассы.




                                                                                                                                 вари-




                                                                                                                                                                      108,8

                                                                                                                                                                              136,0
                                                                                                                                                        27,2

                                                                                                                                                               68,0
                                                                                                                                 г на

                                                                                                                                 ант
   Затем, исходя из результатов усреднения раствора мелас-




                                                                                                                                                 -




                                                                                                                                                                                      -

                                                                                                                                                                                             -

                                                                                                                                                                                                    -
                                                                                                                   сахароза
сы, делают расчет необходимого количества соды или 1н




                                                                                                                                                                      13,6

                                                                                                                                                                              17,0
H2SO4 на всю пробу – 3100 г раствора мелассы. Рассчитан-




                                                                                                                                                        3,4

                                                                                                                                                               8,5
                                                                                                                                 %




                                                                                                                                                 -




                                                                                                                                                                                      -

                                                                                                                                                                                             -

                                                                                                                                                                                                    -
ное количество нейтрализатора вносят в общий объем рас-




                                                                                                                                 р-ра ме-
                                                                                                                                 мл раз-
твора, тщательно перемешивают 5 мин и вновь берут пробу




                                                                                                                                 бавлен-


                                                                                                                                 лассы
                                                                                                                                 ного
для проверки рН. Если потенциометр показывает рН от 6,8




                                                                                                                                                 850

                                                                                                                                                        680

                                                                                                                                                               425

                                                                                                                                                                      170



                                                                                                                                                                                      680

                                                                                                                                                                                             425
до 7,2 , считают, что исходный раствор мелассы готов для




                                                                                                                                                                              -




                                                                                                                                                                                                    -
дальнейшего приготовления среды. Если рН меньше или




                                                                                                                                 ровка по
                                                                                                                   меласса




                                                                                                                                 сахару,
больше, все повторяется заново, т.е. вновь проводится по-

                                                                   среде




                                                                                                                                 дози-




                                                                                                                                                 17,0

                                                                                                                                                        13,6




                                                                                                                                                                                      13,6
                                                                                                                                                               8,5

                                                                                                                                                                      3,4




                                                                                                                                                                                             8,5
тенциометрическое титрование и производятся соответст-




                                                                                                                                 %




                                                                                                                                                                              -




                                                                                                                                                                                                    -
                                                                                                                   анта
                                                                                                                   мер
                                                                                                                   Но-


                                                                                                                   ри-
                                                                                                                   ва-




                                                                                                                                                 1

                                                                                                                                                        2

                                                                                                                                                               3

                                                                                                                                                                      4

                                                                                                                                                                              5

                                                                                                                                                                                      6

                                                                                                                                                                                             7

                                                                                                                                                                                                    8