Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 24 стр.

                                                               22

вующие расчеты.                                                      3. Определение концентрации сухих веществ в исходной
   После усреднения объем мелассы доводится до 3500 мл                                        среде
водопроводной водой. В таком растворе будет сахара при-                 В оставшейся после розлива в колбы исходной среде оп-
близительно в 3 раза меньше. Исходная меласса имеет со-             ределяется содержание сухих веществ по рефрактометру.
держание сахара 48-50%, т.е. в 1200 г его будет ~ 600 г, а в        Для этого 10-12 мл среды профильтровывают через склад-
разбавленном растворе процент его понизится ~ в 3 раза, он          чатый фильтр в пробирку, доводят температуру фильтрата
будет ~ 17,5%, т.е. каждые 100 мл будут содержать 17 г са-          до 20оС и производят замер показаний на рефрактометре.
хара. Этот раствор является исходным для приготовления
сред.                                                                              4. Определение рН среды
   Обычно в среде для промышленного культивирования                   рН среды определяется в нефильтрованной пробе потен-
Asp. niger штамм 119 должно содержаться углеводов 16-               циометрически.
17%, поэтому в вариантах сред выбирается такое количест-
во источников углерода, чтобы их содержалось примерно                        5. Определение содержания сахара в среде
16-17% (табл.2).                                                       Инверсия сахара (перевод в моносахара) осуществляется
   Берут, согласно дозировкам, указанным в табл.2, необхо-          кислотным гидролизом среды.
димое количество разбавленного мелассного раствора, за-                Оборудование и посуда: водяная баня, мерная колба на
тем вносят в него, если это необходимо, навеску сахарозы            100 мл.
или глюкозы, тщательно перемешивают и доводят объем до                 Реактивы: 25%-ный раствор HCl, насыщенный раствор
850 мл. В варианте 1-ом просто отмеряется 850 мл исходно-           Na2CO3.
го мелассного раствора, а в вариантах 5-ом и 8-ом навеска                                 Ход работы:
сахара растворяется в горячей воде и объем раствора дово-              В мерную колбу на 100 мл переносят 5 мл среды, затем
дится до 850 мл водой. Далее к 850 мл приготовленной сре-           добавляется цилиндром 45 мл дистиллированной воды и 2
ды добавляется, согласно данным табл.1, растворы солей и            мл 25% HCl, содержимое колбы перемешивается и колба
вода. В результате получается исходный объем среды 850              помещается на 5 мин в кипящую водяную баню для того,
мл + 4,5 + (∑=10 мл), равным 864,5 мл.                              чтобы произвести инверсию сахарозы до редуцирующих
   Эта готовая питательная среда нагревается до кипения и           сахаров. После гидролиза содержимое колбы охлаждается,
кипятится 10-15 мин, затем ее охлаждают и разливают по              нейтрализуется содой до прекращения выделения углеки-
400 мл в две конические колбы, закрывают колбы ватными              слоты и доводится до метки дистиллированной водой. За-
пробками, бумажными колпаками и стерилизуют в автокла-              тем производится определение редуцирующих веществ по
ве при 0,5 ати в течение 30 мин. После стерилизации колбы           методу Бертрана.
вынимают, охлаждают и приготавливают для засева.                       В коническую колбу наливают по 20 мл реактивов А и
                                                                    Б. Перемешивают. Затем наливают 10 мл гидролизата и 10
                                                                    мл дистиллированной воды. Перемешивают и ставят полу-
                                                                    ченную смесь на электроплитку и одновременно нужно по-