Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 26 стр.

                                                                            24

                          Второе занятие                                            За это время почти весь сахар из среды исчезает, частич-
                                                                                 но превращаясь в лимонную кислоту. Выход лимонной ки-
                      План работы                                                слоты составляет от сахара 58-60%. Через 7-8 суток сбро-
   1. Отделение сброженного раствора от пленки.                                  женный раствор подвергается анализу.
   2. Определение в сброженном растворе общей титруе-
      мой кислотности и съема кислоты г/м2 за сутки.                                    1.Отделение сброженного раствора от пленки
   3. Определение лимонной, щавелевой и глюконовой                                  Снимают со стакана ватномарлевую салфетку и, осто-
      кислот и их расчет.                                                        рожно, наклоняя стакан, сливают из-под пленки весь сбро-
   4. Определение сухого веса мицелия и расчет его про-                          женный раствор в мерный цилиндр на 500 мл. В конце сли-
      дуцирующей способности по лимонной кислоте.                                ва пленку поддерживают палочкой. Затем пленку опроки-
   5. Определение в среде остаточного сахара.                                    дывают субстратным мицелием вверх и промывают его ки-
   6. Расчет потребленного сахара.                                               пящей водой два раза по 30-35 мл. Промывные воды при-
   7. Расчет выхода лимонной кислоты в % от потреблен-                           соединяют к сброженному раствору и замеряют весь объем
      ного сахара среды.                                                         культуральной жидкости и промывных вод (Vобщ.к.ж.). Этот
      Для регистрации результатов работы формируется                             раствор после перемешивания (его следует просто вылить в
   нижеприведенный журнал наблюдения                                             стакан) служит исходным материалом для дальнейших оп-
                                                Таблица3                         ределений.
          Влага           Титруе-    рН     %    Содер-   Содер-   Со-
Мас-са   Мас-са   Масса   мая        сре-   РВ   жание    жание    держа-
пус-     бюк-     после   кислотно   ды          лимон-   щаве-    ние            2. Определение в сброженном растворе общей титруе-
той      сы       высу-   сть                    ной
                                                 киc-
                                                          левой
                                                          кис-
                                                                   глю-
                                                                   коно-
                                                                                      мой кислотности и съема кислоты г/м2 за сутки
бюк-      с       ши-
сы       навес-   вания                          лоты     лоты     вой              Отбирают 5 мл анализируемого раствора (сброженный
         кой                                                       кис-
                                                                   лоты
                                                                                 раствор и промывные воды), разбавляют дистиллированной
                                                                                 водой до 150 мл, добавляют 3-4 капли фенолфталеина и
                                                                                 титруют 0,25н раствором щелочи.
                                                                                     Содержание лимонной кислоты (х) в % вычисляют по
   Культивирование обычно проходит в несколько этапов.
                                                                                 формуле:
Сначала на 0,5-1 сутки появляется тоненькая пленка гриба,
сквозь которую проглядывает кое-где среда, затем она                                                A • F • 100
                                                                                               X =              ,
утолщается и приобретает резко выраженную складчатость.                                                  5
Субстратный мицелий бежеватого цвета. Сверху в первые                            где А – количество щелочи, пошедшей на титрование, в мл;
2-4 суток покрыта беловато-сероватым пушком, на 6-7 су-                              F – фактор щелочи по лимонной кислоте (1 мл 0,1н рас-
тки наблюдается сначала очаговое спороношение, затем оно                         твора NaOH соответствует 0,007 г лимонной кислоты).
покрывает всю внешнюю поверхность черным налетом                                    При использовании 0,25н раствора NaOH пересчитывают
(цвет конидий у гриба - черный).                                                 фактор щелочи по лимонной кислоте:
                                                                                   1 мл 0,1н NaOH - F0,1 = 0,007 г лимонной кислоты;