Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 25 стр.

UptoLike

Рубрика: 

23
ставить колбу с дистиллированной водой. После появления
первых пузырьков вскипания начинают отсчет времени ки-
пения раствора 3 минуты. По истечению этого времени
колбочку снять с плитки. Выпадает красный осадок закиси
меди. Жидкость над осадком должна иметь синий цвет; ес-
ли она бесцветна, нужно взять меньшее количество – 5 мл,
доведя объем до 10 мл добавлением дистиллированной во-
ды. Раствор фильтруют горячим, несколько раз промывая
осадок в колбе и на фильтре горячей дистиллированной во-
дой до полного обесцвечивания промывных вод, стекающих
с фильтра.
Осадок в колбе и на фильтре растворяют сернокислым
железом в серной кислоте, добавляя его каждый раз не-
большими порциями. После растворения осадка колбу и
фильтр промывают холодной дистиллированной водой до
отсутствия кислой реакции в промывных водах. Замерить
общее количество (b). Содержимое колбы титруют раство-
ром перманганата калия до слабо-розового окрашивания.
Рассчитывается % содержания сахара в среде и коли-
чество сахара в пробе (400 мл).
Пример расчета.
1.В 10 мл гидролизата найдено, например, 80,5 мг инверт-
ного сахара.
Составляем цепочку разведения: 5 мл исходного раствора
100 мл 10 мл на определение сахара по Бертрану.
Рассчитываем количество сахара в 1 мл раствора:
млмг /161
510
11005,80
=
среды .
2.Рассчитываем % содержания сахара в исходном растворе:
%1,16
1000
100161
=
,
где 1000 – коэффициент пересчета мг в г;
100 – приведение показаний к %.
3. Рассчитываем количество сахара в пробе (400 мл):
4,64
100
1,16400
=
г редуцирующих веществ.
6. Засев стерильной среды спорами продуцента,
характеристика условий культивирования
Засев среды осуществляется в боксе. Стол и руки проти-
раются ватным тампоном со спиртом. На столе размещается
штатив с посевными пробирками, пустые стерильные ста-
каны, колбы со стерильной средой и горелка. Колбы поме-
щают с правой стороны, стаканыс левой. Зажигают го-
релку, развязывают стаканы, но не открывают, снимают бу-
мажные колпачки с колб. Стаканы размещают очень близко
к горелке с левой стороны. Колбу со средой берут в правую
руку. Открывают левой рукой пробку у колбы и обжигают
горлышко колбы на пламени. Левой же рукой (большим и
указательным пальцами) приоткрывают салфетку на стака-
не и выливают в него содержимое колбы. Закрывают стакан
салфеткой, колбу пробкой и отставляют ее влево. Затем в
правую руку берут посевную пробирку, открывают ее также
как колбу, вносят споровую суспензию в стакан, закрывают
стакан и пробирку, посев окончен. Затем тоже самое делают
со второй пробой. Стаканы с засеянной средой завязывают,
подписывают и ставят в термостат при температуре 32-34
о
С
на 7-8 суток на выращивание.
                                                           23

ставить колбу с дистиллированной водой. После появления                           161 • 100
первых пузырьков вскипания начинают отсчет времени ки-                                      = 16,1% ,
                                                                                    1000
пения раствора 3 минуты. По истечению этого времени             где 1000 – коэффициент пересчета мг в г;
колбочку снять с плитки. Выпадает красный осадок закиси             100 – приведение показаний к %.
меди. Жидкость над осадком должна иметь синий цвет; ес-         3. Рассчитываем количество сахара в пробе (400 мл):
ли она бесцветна, нужно взять меньшее количество – 5 мл,
доведя объем до 10 мл добавлением дистиллированной во-                        400 • 16,1
ды. Раствор фильтруют горячим, несколько раз промывая                                    = 64,4 г редуцирующих веществ.
                                                                                100
осадок в колбе и на фильтре горячей дистиллированной во-
дой до полного обесцвечивания промывных вод, стекающих
с фильтра.
                                                                       6. Засев стерильной среды спорами продуцента,
   Осадок в колбе и на фильтре растворяют сернокислым
                                                                          характеристика условий культивирования
железом в серной кислоте, добавляя его каждый раз не-
                                                                   Засев среды осуществляется в боксе. Стол и руки проти-
большими порциями. После растворения осадка колбу и
                                                                раются ватным тампоном со спиртом. На столе размещается
фильтр промывают холодной дистиллированной водой до
                                                                штатив с посевными пробирками, пустые стерильные ста-
отсутствия кислой реакции в промывных водах. Замерить
                                                                каны, колбы со стерильной средой и горелка. Колбы поме-
общее количество (b). Содержимое колбы титруют раство-
                                                                щают с правой стороны, стаканы – с левой. Зажигают го-
ром перманганата калия до слабо-розового окрашивания.
                                                                релку, развязывают стаканы, но не открывают, снимают бу-
      Рассчитывается % содержания сахара в среде и коли-
                                                                мажные колпачки с колб. Стаканы размещают очень близко
чество сахара в пробе (400 мл).
                                                                к горелке с левой стороны. Колбу со средой берут в правую
                                                                руку. Открывают левой рукой пробку у колбы и обжигают
                      Пример расчета.
                                                                горлышко колбы на пламени. Левой же рукой (большим и
1.В 10 мл гидролизата найдено, например, 80,5 мг инверт-
                                                                указательным пальцами) приоткрывают салфетку на стака-
ного сахара.
                                                                не и выливают в него содержимое колбы. Закрывают стакан
Составляем цепочку разведения: 5 мл исходного раствора
                                                                салфеткой, колбу пробкой и отставляют ее влево. Затем в
→ 100 мл → 10 мл на определение сахара по Бертрану.
                                                                правую руку берут посевную пробирку, открывают ее также
   Рассчитываем количество сахара в 1 мл раствора:
                                                                как колбу, вносят споровую суспензию в стакан, закрывают
                                                                стакан и пробирку, посев окончен. Затем тоже самое делают
             80,5 • 100 • 1
                            = 161мг / мл   среды .              со второй пробой. Стаканы с засеянной средой завязывают,
                10 • 5                                          подписывают и ставят в термостат при температуре 32-34оС
                                                                на 7-8 суток на выращивание.
2.Рассчитываем % содержания сахара в исходном растворе: