Общая биотехнология. Ч. 2. Данилова Т.Е - 29 стр.

                                                            27

водяную баню. Цитрат и оксалат кальция выпадают в оса-           Примечание. В мелассных сброженных растворах, помимо
док, вместе с которым оседает и избыток кальция в виде           свободных кислот, содержатся кальциевые соли, поэтому
мела. В растворе остается глюконовокислый кальций и не-          сумма трех кислот по анализу превышает кислотность по
большое количество цитрата кальция (т.к. он растворим в          титрованию. При анализе этих растворов нужно определить
воде). Горячий раствор фильтруют и осадок промывают го-          кальций и остаточную кислотность в отжиме.
рячей водой до отрицательной реакции на хлор (проба с
азотнокислым серебром, подкисленный азотной кислотой).             4. Определение сухого веса мицелия и расчет его проду-
   Глюконовую кислоту в отфильтрованном растворе опре-                   цирующей способности по лимонной кислоте
деляют по кальцию, вычитая кальций, связанный с лимон-               Пленку гриба, оставшуюся в стакане, не нарушая ее це-
ной кислотой. Объем фильтрата и промывных вод замеряют           лостности, переносят на большую воронку Бюхнера, где на
и вносят поправки на растворимость цитрата кальция. Затем        дно положен фильтр. Сверху пленку прикрывают 2-3 круг-
раствор нагревают до кипения и в течение 10-15 мин осаж-         лыми фильтрами и, надавливая сверху дном стакана, под-
дают кальций кипящим насыщенным раствором щавелево-              сушивают под вакуумом в течение 15-20 мин , затем пленку
кислого аммония.                                                 помещают в большой подсушенный до постоянной массы
   Реакция осаждения оксалата кальция:                           двойной пакет и высушивают в приборе Чижовой в течение
        Ca (C6H11O7)2 + (NH4)2C2O4 = CaC2O4 + 2NH4Cl.            7-8 мин при температуре 170-175оС.
   Раствор кипятят 10 мин, охлаждают, фильтруют, осадок              После высушивания пакет с пленкой помещают в экси-
промывают водой до отрицательной реакции на хлор (проба          катор через 3-4 мин взвешивают на технических весах. По
с азотнокислым серебром), растворяют в 20-25 мл 10%-ной          разности подсчитывают вес сухой биомассы мицелия (Бм) и
серной кислоты, нагревают до 80оС и титруют 0,1н раство-         затем его продуцирующую способность (Псм).
ром перманганата калия. Содержание глюконовой кислоты,                                  Пример расчета.
эквивалентное количеству лимонной кислоты, вычисляют                  1. Вес сухого пакета – 5,04 г.
по формуле:                                                          2. Вес сухого пакета с сухим мицелием – 8,32 г.
                            V • 0,0055                               3. Вес сухой биомассы мицелия (Бм)
               (0,007 • n3 − 3         ) • 100                                       Бм = 8,32 г – 5,04 г = 3,28 г.
          Х3 =                  100            .
                             a3                                      4. Во всей пробе было найдено, например, 37,3 г ли-
                                                                          монной кислоты (п.3.2) .
                                                                     5. Продуцирующая способность мицелия (Псм)
Обозначения указаны выше.
   Общее количество всех трех кислот (щавелевой и глюко-
                                                                          37,3 37,3
новой в пересчете на эквивалентное количество лимонной)             Псм =     =      = 11,37 г / г , т.е. 11,37 г лимонной ки-
должно быть равно общей кислотности, определенной в                        Бм   3,28
сброженном растворе титрованием. Кроме того, содержание             слоты синтезируется за цикл выращивания 1 г биомассы
всех кислот пересчитывают в процентах к общей кислотно-             продуцента.
сти исследуемого раствора.