Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 14 стр.

   7. Осадок сушить в течение 10–15 мин. Прибавить 30–40 мкл dН2О и
      перемешать на вортексе. Инкубировать при комнатной температуре
      5 мин.
   8. Центрифугировать 30 с при 12 000 rpm. Перенести супернатант в но-
      вую пробирку.
   9. Повторить п. 9 и 10. Долить супернатант в ту же пробирку.
   10. Хранить при –20 оС.


Комментарии к методике:
1) ДНК из геля необходимо вырезать как можно точнее. Кроме того, нельзя долгое
   время светить на гель ультрафиолетом, поскольку ДНК может пришиться к гелю.
2) Буфер PE желательно готовить непосредственно перед использованием. Для его
   приготовления 100 мкл необходимо взять 20 мкл раствора PE из набора и прибавить
   80 мкл 96% этанола.
3) При подсушивании осадка в п. 7 важно не пересушить его, поскольку в длинных
   молекулах ДНК могут образоваться разрывы, что значительно ухудшит качество
   препарата.




       Глава II. Определение качественных и количественных по-
                     казателей нуклеиновых кислот

      Метод определения концентрации нуклеиновых кислот (ДНК или
РНК) в растворе основан на существовании у ДНК и РНК максимума по-
глощения при длине волны 260 нм (рис. 3). Это означает, что в растворах
нуклеиновых кислот максимальная фотометрическая абсорбция наблюда-
ется при 260 нм и прямо коррелирует с концентрацией ДНК или РНК.




                                       14