Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 15 стр.

 Рис. 3. Спектр поглощения нуклеиновых кислот при разных длинах волн


Работа 5. Определение концентрации ДНК или РНК

     При постановке измерения образец ДНК разбавляют дистиллирован-
ной водой в 40 раз (к 5 мкл раствора ДНК добавляют 195 мкл воды). Изме-
рение поглощения при 260 нм проводят в кювете с длиной оптического пу-
ти 1 мм, используя воду в качестве контроля. Значение концентрации ДНК
в исходном растворе (мкг/мкл) находят, умножая значение поглощения
при длине волны 260 нм на К = 20 (К – молекулярный коэффициент экс-
тинкции).

                      [ДНК] = А260 ⋅ К

     РНК разбавляют водой в 10 раз (к 20 мкл раствора ДНК добавляют
180 мкл воды). Измерение поглощения при 260 нм проводят в кювете с
длиной оптического пути 1 мм, используя воду в качестве контроля. Зна-
чение концентрации РНК в исходном растворе (мкг/мкл) находят, умножая
значение поглощения при длине волны 260 нм на К = 4 (К – молекулярный
коэффициент экстинкции).

                      [РНК] = А260 ⋅ К

                                   15