Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 17 стр.

UptoLike

17
красителя (как правило, бромистый этидий или SYBR Green I). Для фрак-
ционирования более крупных молекул ДНК (миллионы пар оснований) де-
натурированной ДНК и РНК приходится использовать специальные систе-
мы электрофореза. Иногда для решения специальных задач для разделения
ДНК применяют полиакриламидные гели. Так, в 20 % полиакриламидном
геле можно разделить фрагменты ДНК, состоящие всего из шести основа
-
ний и различающиеся лишь одним нуклеотидом.
Детекция НК основана на использовании интеркалирующих веществ,
активирующих свою способность к флуоресценции в результате присоеди-
нения к ДНК или РНК. В качестве основного представителя применяется
бромистый этидий и SYBR Green I. Этот способ детекции основан на том
факте, что флуоресценция бромистого этидия под действием ультрафиоле-
тового излучения
значительно возрастает при их внедрении в двухцепо-
чечные молекулы ДНК. Однако он способен взаимодействовать и с моле-
кулами РНК, но менее интенсивно.
Рис. 4. Механизм детекции ДНК с использованием интеркалирующего
красителя SYBR Green I
красителя (как правило, бромистый этидий или SYBR Green I). Для фрак-
ционирования более крупных молекул ДНК (миллионы пар оснований) де-
натурированной ДНК и РНК приходится использовать специальные систе-
мы электрофореза. Иногда для решения специальных задач для разделения
ДНК применяют полиакриламидные гели. Так, в 20 % полиакриламидном
геле можно разделить фрагменты ДНК, состоящие всего из шести основа-
ний и различающиеся лишь одним нуклеотидом.
     Детекция НК основана на использовании интеркалирующих веществ,
активирующих свою способность к флуоресценции в результате присоеди-
нения к ДНК или РНК. В качестве основного представителя применяется
бромистый этидий и SYBR Green I. Этот способ детекции основан на том
факте, что флуоресценция бромистого этидия под действием ультрафиоле-
тового излучения значительно возрастает при их внедрении в двухцепо-
чечные молекулы ДНК. Однако он способен взаимодействовать и с моле-
кулами РНК, но менее интенсивно.




      Рис. 4. Механизм детекции ДНК с использованием интеркалирующего
                       красителя SYBR Green I

                                   17