Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 25 стр.

UptoLike

25
рого цикла амплификации, в котором происходит образование искомого спе-
цифического фрагмента ДНК (ампликона). С каждым последующим циклом
количество копий участка ДНК удваивается. Таким образом, происходит на-
копление ампликонов по формуле:
х = 2n , где n – число циклов.
В результате 30–40 циклов в растворе накапливается около 100 мил-
лионов молекул ампликона. Этого количества достаточно для визуальной
детекции этого фрагмента методом электрофореза в агарозном геле, со-
держащем бромистый этидий.
Рис. 8. Схематическое изображение амплификации ДНК: 1 – денатурация
при 96
о
C; 2 – отжиг в 68
o
C; 3 – удлинение в 72
o
C; 4 – окончание первого
цикла. (P – Taq-ДНК-полимераза). Две образующихся цепи ДНК являются
шаблоном для следующего цикла. Таким образом, происходит удваивание
количества ДНК в каждом новом цикле
рого цикла амплификации, в котором происходит образование искомого спе-
цифического фрагмента ДНК (ампликона). С каждым последующим циклом
количество копий участка ДНК удваивается. Таким образом, происходит на-
копление ампликонов по формуле:
                        х = 2n , где n – число циклов.
     В результате 30–40 циклов в растворе накапливается около 100 мил-
лионов молекул ампликона. Этого количества достаточно для визуальной
детекции этого фрагмента методом электрофореза в агарозном геле, со-
держащем бромистый этидий.




 Рис. 8. Схематическое изображение амплификации ДНК: 1 – денатурация
 при 96 оC; 2 – отжиг в 68 oC; 3 – удлинение в 72 oC; 4 – окончание первого
 цикла. (P – Taq-ДНК-полимераза). Две образующихся цепи ДНК являются
 шаблоном для следующего цикла. Таким образом, происходит удваивание
                  количества ДНК в каждом новом цикле

                                    25