Идентификация и исследование экспрессии генов. Епринцев А.Т - 5 стр.

     Раздел 1. Методы работы с нуклеиновыми
кислотами
     Исследования в области молекулярной биологии связаны с целена-
правленным манипулированием фрагментами нуклеиновых кислот (НК)
или целыми генетическими конструкциями, целью которых является полу-
чение с помощью лабораторных методов организмов с новыми, в том чис-
ле и не встречающимися в природе, комбинациями наследственных
свойств. Таким образом, изменение наследственных свойств организма с
помощью генной инженерии сводится к конструированию из различных
фрагментов нового генетического материала, введения этого материала в
рецепиентный организм, создания условий для его функционирования и
исследования его уровня экспрессии. В основе молекулярной биологии
лежат современные методы физико-химической биологии. Данные методы
позволяют получать в чистом виде генетический материал клетки, прово-
дить с ним различные манипуляции, позволяющие идентифицировать как
отдельные компоненты, так и целый геном организма. Важным в изучении
функционирования живого организма является исследование функцио-
нальной активности генетического материала клетки.
     На первой стадии проведения анализа проба подвергается специаль-
ной обработке, в результате которой происходит лизис клеточного мате-
риала, удаление белковых и полисахаридных фракций и получение раство-
ра ДНК или РНК, свободного от ингибиторов и готового для дальнейшей
амплификации. Выбор методики выделения ДНК (РНК) в основном опре-
деляется характером используемого материала.
     В зависимости от типа биологического материала лизис клеток осу-
ществляется различными способами. Клетки биоматериала разрушаются
различными способами, наиболее часто используемым из которых являет-
ся механическое разрушение. Часто (в случае работы с растительными и

                                  5