Дифтерия. Эпидемиология и профилактика. Галеев А.Г - 10 стр.

диагноза, по эпидпоказаниям, профилактическое обследование), дата и время            Культуру, выросшую на скошенном сывороточном агаре или с пробы Пизу,
взятия материала.                                                               после определения ее чистоты, засевают на среду для изучения биохимических
                                                                                свойств (среда Гисса с сахарозой, глюкозой, крахмалом, проба Заксе или бульон
                                                                                с мочевиной).
                                                                                      Повторно (через 48 часов) учитывают результаты пробы на токсигенность,
                                      18                                        поставленной во 2-й день исследования. И учитывают сахаролитические
                                                                                                                        19
    Ход исследования
                                                                                свойства и уреазную активность в пробах, поставленных в 3-й день
       1-й день - материал засевают раздельно на поверхность одной из           исследования.
питательных сред, разлитых в чашки Петри. Посев от одного лица производят            При отсутствии линий преципитации через 48 часов после постановки
на одну чашку, на половине среды сеют из ротоглотки, а на второй половине из    пробы на токсигенность, но положительных результатах проб на цистиназу,
носа. На участке 2×1 см2 втирают со всех сторон тампон, затем засевают          глюкозу, отрицательных результатах на уреазу и сахарозу, культуры
оставшуюся поверхность половины чашки. Засеянные чашки помещают в               идентифицируют как нетоксигенные коринебактерии дифтерии.
термостат при температуре 37 °С.                                                     При выделении токсигенных коринебактерий дополнительно выдают ответ
     2-й день. Колонии, выросшие на чашках, просматривают через 24 часа         через 72 или 96 часов с момента первичного посева исследуемого материала.
после посева материала на микроскопе. И колонии, похожие на дифтерийные,             Таким образом, наличие специфических линий преципитации,
отбирают для дальнейшего исследования. “Подозрительные” колонии на              положительная проба на цистиназу, отрицательная проба на уреазу, характерные
кровяно-теллуритовых средах через 24 часа роста светло-серого цвета, выпуклые   культуральные и биохимические свойства (сахароза, глюкоза, крахмал)
с ровными краями, через 48 часов - серые с металлическим оттенком, с ровными    позволяют заключить, что выделенная культура относится к коринебактериям
или слегка изрезанными краями, крошащиеся при прикосновении петлей. Из          дифтерии (токсигенным), варианту гравис или митис.
“сомнительных” колоний готовят мазки.                                                Для выделения гена дифтерийного токсина предложено использовать
     Если при микроскопировании обнаруживают палочки, характерные для           полимеразную цепную реакцию (ПЦР).
рода коринебактерий, их отбирают для дальнейшей идентификации, а при                 Для выявления дифтерийного токсина и продуктов его распада можно
обнаружении других форм, дальнейшее изучение этих колоний прекращают.           применять иммуноферментный анализ (ИФА) и реакцию нейтрализации антител
     В случае роста “подозрительных” однотипных колоний, изучают                (РНАТ).
токсигенные их свойства не менее чем у двух изолированных колоний, путем             Для серологической диагностики дифтерии применяют РПГА и РТГА –
посева одной половины каждой колонии на среду для определения                   реакцию пассивной гемагглютинации и торможения гемагглютинации.
токсигенности и необожженной петлей - на среду Пизу, а другую половину в             По предложению ВОЗ используют следующие критерии характеризующие
пробирку со скошенным агаром для сохранения и накопления культуры.              степень восприимчивости к дифтерии в зависимости от уровня антиток-сических
     3-й день. Через 24 часа, при появлении специфических линий                 антител:
преципитации на среде для определения токсигенности, изучаемую культуру              менее 0,01 МЕ/мл – обследуемый восприимчив к дифтерии;
идентифицируют как коринебактерии (токсигенные) дифтерии. При отсутствии                   0,1 МЕ/мл – защитный уровень антител достаточен;
специфических линий чашку инкубируют еще 24 часа.                                    более 1,0 МЕ/мл – уровень, обеспечивающий стойкую и длительную
     Чашки с первичным посевом исследуемого материала просматривают             невосприимчивость к дифтерии.
визуально и с помощью микроскопа через 36-48 часов инкубации в термостате.
При наличии “подозрительных” колоний изучают их токсигенные свойства. При                               Профилактические мероприятия
отсутствии “подозрительных” колоний выдают окончательный ответ, что
коринебактерии дифтерии не выявлены.                                                 Основным методом защиты от дифтерии является специфическая профи-
     4-й (или 5-й) день. При появлении специфических линий преципитации на      лактика. У привитых против дифтерии людей формируется антитоксический
среде для определения токсигенности (через 24 часа инкубации пробы на           иммунитет, который, однако, не всегда предотвращает заболевание или
токсигенность, 48-часового роста первичного посева), положительной пробе на     носительство.
цистеназу выдают документированный ответ о выделении токсигенных                     Плановая иммунизация против дифтерии осуществляется в соответствии с
коринебактерий дифтерии.                                                        приказом МЗ РФ № 229 от 27.06.2001 г. “О национальном календаре
                                                                                профилактических прививок” в следующие сроки:
                                                                                     3 месяца – 1-я вакцинация АКДС (доза 0,5 мл, внутримышечно);