Основы клинической иммунологии и методологические подходы к оценке иммунного статуса. Гончаров А.Г - 49 стр.

   1. Гепаринизированная исследуемая кровь.
   2. Конканавалин А.
   3. Изотонический раствор хлорида натрия.
   4. Воск или пластилин.
   5. Капилляры из набора для определения С-реактивного белка.
   6. Центрифужные пробирки.
   7. Микроскоп с окуляр-микрометром.

                             Описание метода
    Перед работой необходимо подготовить капилляры. С этой целью отбирают
капилляры с одинаковым внутренним диаметром. На капилляры наносят метку
на расстоянии 1/3 длины от любого края.
    На два часовых стекла или в две лунки планшета для иммунологических ис-
следований наливают по 0.2 мл исследуемой крови. В первую порцию вносят
0.05 мл раствора Кон А в концентрации 10 мкг/мл (препарат растворяют в сте-
рильном изотоническом растворе хлорида натрия. Полученными смесями запол-
няют капилляры на 2 /3 длины (до метки). На каждую пробу берут не менее 6
капилляров (3 опытных и 3 контрольных). Заполненные капилляры запаивают
воском или пластилином и помещают в маркированные центрифужные пробир-
ки (контрольные и опытные капилляры помещают в разные пробирки). Капил-
ляры в пробирке необходимо зафиксировать комочком ваты или пластилином в
строго вертикальном положении. После этого капилляры центрифугируют в те-
чение 5 мин при 800 об/мин, а затем помещают в термостат в вертикальном по-
ложении и инкубируют при температуре 37°С в течение 24 часов.

                            Учет результатов
    После инкубации производят учет результатов. С этой целью под микроско-
пом с помощью окуляр-микрометра определяют величину миграции основной
массы лейкоцитов от границы эритроцитарного осадка в контроле и опыте. Ре-
зультаты выражают в виде процента миграции в опыте относительно контроля.
    В норме процент миграции составляет 40-70%; повышение до 90 % или сни-
жение до 30% является умеренным; выше 90% и ниже 30% - значительным.
Увеличение показателя миграции свидетельствует о снижении функциональной
активности лимфоцитов: их способности продуцировать лимфокины, в частно-
сти, фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов (ФУМ). При радиационном
иммунодефиците наиболее ранним и типичным признаком является увеличение
показателя миграции до 90% и выше.


   ИССЛЕДОВАНИЕ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА (В-СИСТЕМЫ).
     ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА В-ЛИМФОЦИТОВ, ИМЕЮЩИХ
     ПОВЕРХНОСТНЫЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЕ РЕЦЕПТОРЫ



                                                                         47