Основы клинической иммунологии и методологические подходы к оценке иммунного статуса. Гончаров А.Г - 50 стр.

    На поверхности В-лимфоцитов имеются иммуноглобулиновые рецепторы,
которые могут быть выявлены с помощью специфических антисывороток, ме-
ченных ФИТЦ, причем методика позволяет определять как общее количество В-
лимфоцитов, несущих на своей поверхности иммуноглобулиновые рецепторы,
так и дифференциально количество клеток с рецепторами отдельных классов:
IgA, Ig G, Ig M.
                       Материалы и оборудование
   1. Исследуемая проба лимфоцитов в концентрации 2×10 кл/мл.
   2. Моноспецифические антисыворотки к иммуноглобулинам человека, ме-
ченные ФИТЦ.
   3. Забуференный изотонический раствор хлорида натрия.
   4. 50% раствор глицерина на забуференном изотоническом растворе хлорида
натрия.
   5. Люминесцентный микроскоп.
   6. Термостат.
   7. Поли-L-лизин (молекулярная масса 40000-80000).

                              Описание метода
    На мазок лимфоцитов наносят 10-15 мкл моноспецифической сыворотки к
иммуноглобулинам М, G, A, меченной ФИТЦ, и разведенной 1:50 в ЗФР и инку-
бируют во влажной камере в течение 40 мин при температуре 20 С.
    Последующие этапы приготовления мазка, учета и анализа результатов опи-
саны выше.
    В норме в периферической крови циркулируют от 8 до 19% клеток, несущих
иммуноглобулиновые рецепторы (ВIg+), 3-10% клеток, несущих IgM (BIgM+),
2-6% клеток, несущих IgG (BIg+), 1-3% клеток, несущих IgA (BIgA+).
    При исследовании пробы следует определять как общее количество имму-
ноглобулиновых клеток, так и их распределение по классам. Снижение количе-
ства клеток всех или некоторых классов, а также нарушение их соотношения
(BIgM+ : BIgG+ : BIgA+), равного 6:4:2, свидетельствует о наличии поврежде-
ний в В-системе иммунитета.


        КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ
            МЕТОДОМ РАДИАЛЬНОЙ ИММУНОДИФФУЗИИ

   Метод радиальной иммунодиффузии в геле агарозы является в настоящее
время основным при определении содержания иммуноглобулинов различных
классов в сыворотке крови.

                          Материалы и оборудование
     1. Стекла 9×12 см.


48