Основы клинической иммунологии и методологические подходы к оценке иммунного статуса. Гончаров А.Г - 52 стр.

UptoLike

Рубрика: 

50
фическую сыворотку. В 4 лунки агаровой пластины вносят цельную и разведен-
ную в 2, 4, 8 раз стандартную (эталонную) сыворотку с известным содержанием
иммуноглобулинов всех классов. Ампула со стандартной сывороткой входит в
каждый набор моноспецифических сывороток. После внесения исследуемых сы-
вороток пластины помещают во влажную камеру, в качестве которой можно ис-
пользовать эксикатор с налитой
на дно водой или другую подходящую посуду с
крышкой и инкубируют в течение 24 часов (для определения IgA и IgG) или 48
часов (для определения IgM и IgD).
После инкубации пластины извлекают из влажной камеры и окрашивают
подходящим красителем: бромфеноловым синим (состав краски: бромфеноло-
вый синий 0.5 г, свинец уксуснокислый 4% водной раствор - 10 мл, уксусная ки-
слота ледяная 20
мл, вода дистиллированная до 1 л), амидо черным 10 В (состав
краски: 1% амидо черного в 7% водном растворе уксусной кислоты).
Учет результатов
Для оценки результатов реакции измеряют диаметр образовавшихся вокруг
лунок колец преципитации. Затем на полулогарифмической бумаге наносят на
оси абсцисс диаметры колец стандартной сыворотки, а по оси ординат - извест-
ную концентрацию каждого
класса иммуноглобулинов в г/л и строят калибро-
вочный график, с помощью которого вычисляют содержание иммуноглобулинов
в каждой исследуемой сыворотке.
В норме в сыворотке содержится 0,65-1,65 г/л IgM; 7,50-15,45 г/л IgG; 1,25-
2,5 г/л IgA.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ
КОМПЛЕКСОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ
Процессы аутосенсибилизации, происходящие в организме чело века под
воздействием ионизирующей радиации
, сопровождаются накоплением циркули-
рующих иммунных комплексов (ЦИК), в связи с чем определение их содержа-
ния является важным этапом оценки вторичного иммунодефицита.
Материалы и оборудование
1. Сыворотка крови (исследуемая).
2. Буфер боратный.
3. Полиэтиленгликоль (мол. М. 6000).
4. Пробирки.
5. Центрифуга высокоскоростная типа Т-24.
6. Спектрофотометр.
Описание метода
фическую сыворотку. В 4 лунки агаровой пластины вносят цельную и разведен-
ную в 2, 4, 8 раз стандартную (эталонную) сыворотку с известным содержанием
иммуноглобулинов всех классов. Ампула со стандартной сывороткой входит в
каждый набор моноспецифических сывороток. После внесения исследуемых сы-
вороток пластины помещают во влажную камеру, в качестве которой можно ис-
пользовать эксикатор с налитой на дно водой или другую подходящую посуду с
крышкой и инкубируют в течение 24 часов (для определения IgA и IgG) или 48
часов (для определения IgM и IgD).
    После инкубации пластины извлекают из влажной камеры и окрашивают
подходящим красителем: бромфеноловым синим (состав краски: бромфеноло-
вый синий 0.5 г, свинец уксуснокислый 4% водной раствор - 10 мл, уксусная ки-
слота ледяная 20 мл, вода дистиллированная до 1 л), амидо черным 10 В (состав
краски: 1% амидо черного в 7% водном растворе уксусной кислоты).

                              Учет результатов
    Для оценки результатов реакции измеряют диаметр образовавшихся вокруг
лунок колец преципитации. Затем на полулогарифмической бумаге наносят на
оси абсцисс диаметры колец стандартной сыворотки, а по оси ординат - извест-
ную концентрацию каждого класса иммуноглобулинов в г/л и строят калибро-
вочный график, с помощью которого вычисляют содержание иммуноглобулинов
в каждой исследуемой сыворотке.
    В норме в сыворотке содержится 0,65-1,65 г/л IgM; 7,50-15,45 г/л IgG; 1,25-
2,5 г/л IgA.


         ОПРЕДЕЛЕНИЕ УРОВНЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ
                 КОМПЛЕКСОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ

    Процессы аутосенсибилизации, происходящие в организме чело века под
воздействием ионизирующей радиации, сопровождаются накоплением циркули-
рующих иммунных комплексов (ЦИК), в связи с чем определение их содержа-
ния является важным этапом оценки вторичного иммунодефицита.

                         Материалы и оборудование
     1. Сыворотка крови (исследуемая).
     2. Буфер боратный.
     3. Полиэтиленгликоль (мол. М. 6000).
     4. Пробирки.
     5. Центрифуга высокоскоростная типа Т-24.
     6. Спектрофотометр.

                              Описание метода


50