Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 10 стр.

UptoLike

Рубрика: 

19
предварительная концентрация патогенных
микроорганизмов пропусканием исследуемого объекта (жидкой
консистенции) через мембранные фильтры или посевом в среды
накопления;
обнаружение патогенных микроорганизмов методом
заражения чувствительных животных (биопроба);
применение ускоренных методов: серологических,
люминесцентно-серологических и радиоизотопного.
Для иллюстрации последней группы методов ниже
представлена общая характеристика ускоренных методов
исследования воды. Наибольшее применение получил метод
люминесцентно-серологический, который в настоящее время
рекомендуется для обнаружения в воде микроорганизмов
р.р.Escherichia, Salmonella, Shigella, Vibrio и др. Метод
иммунофлюоресценции основан на способности антител,
предварительно обработанных различными флюорохромами
(флюоресцеина изотиоцианат, родамина сульфохлорид,
родамина сульфофторид и др.), адсорбироваться на поверхности
микробной клетки и вызывать ее свечение. Метод
флюоресцирующих антител применяется в трех модификациях:
прямой, непрямой и непрямой метод с добавлением
комплемента. При прямом методе
каплю исследуемой воды, в
которой предполагается наличие патогенных бактерий,
помещают на предметное стекло, обрабатывают специфической
к искомому микроорганизму люминесцирующей сывороткой и
наблюдают под люминесцентным микроскопом. На темном
фоне препарата при положительном результате видна яркая
флюоресценция по периферии клеток. При непрямом методе
обработка препаратов происходит в два этапа: специфической
иммунной сывороткой выявляют присутствие соответствующих
бактерий, на следующем этапе обнаруживают образовавшийся
комплекс обработкой меченой иммунной сывороткой,
содержащей антитела к глобулинам специфической сыворотки.
Этот метод имеет существенное преимущество перед прямым,
так как для выявления любых бактерий используется одна
меченая сыворотка против антителглобулинов, содержащихся
в специфической сыворотке (как правило, глобулинов кролика).
20
При непрямом методе с добавлением комплемента препарат
обрабатывают в 3 этапа: сначала специфической к искомому
микробу иммунной сывороткой, затем - комплементом, который
адсорбируется на комплексе антиген - антитело, и, наконец,
иммунной противокомплементарной флюоресцирующей
сывороткой.
Для повышения эффективности метода следует
предварительно концентрировать бактерии в исследуемой воде
на мембранных фильтрах центрифугированием или посевом в
среды обогащения. В этом случае люминесцентно-
серологическим методом удается обнаружить энтеробактерии
при наличии в пробах воды даже единичных клеток в 1 мл.
Метод флюоресцирующих антител рекомендуется применять
при индикации в воде возбудителей туляремии, чумы, бацилл
сибирской язвы. Однако люминесцентно-серологический метод
является только сигнальным методом индикации патогенных
бактерий в воде, и при положительном его результате должно
проводиться тщательное бактериологическое исследование
воды.
Для ускоренного обнаружения БГКП в воде был
предложен радиоизотопный метод (Корш Л.Е., 1978). Принцип
метода заключается в определении количества БГКП по
количеству метаболической двуокиси углерода, выделяемой при
жизнедеятельности бактерий из элективных сред, меченных
14
С.
Результат можно получить через 5-6 ч.
Тема 1. САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ
КОНТРОЛЬ ВОЗДУХА
Воздух не является благоприятной средой для
жизнедеятельности микроорганизмов. Однако, попадая в воздух,
многие микроорганизмы способны какое-то время находиться в
жизнеспособном состоянии. Среди них большая группа
патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Человек,
болеющий инфекциями верхних дыхательных путей, выделяет
микроорганизмы при разговоре, чихании, кашле и т.д. Через
воздух передается группа заболеваний, которая так и называется
- инфекции дыхательных путей с воздушно-капельным и
воздушно-пылевым механизмами передачи. К таким инфекциям
   • предварительная         концентрация         патогенных   При непрямом методе с добавлением комплемента препарат
микроорганизмов пропусканием исследуемого объекта (жидкой      обрабатывают в 3 этапа: сначала специфической к искомому
консистенции) через мембранные фильтры или посевом в среды     микробу иммунной сывороткой, затем - комплементом, который
накопления;                                                    адсорбируется на комплексе антиген - антитело, и, наконец,
   • обнаружение патогенных микроорганизмов методом            иммунной      противокомплементарной      флюоресцирующей
заражения чувствительных животных (биопроба);                  сывороткой.
   • применение ускоренных методов: серологических,                  Для   повышения     эффективности    метода    следует
люминесцентно-серологических и радиоизотопного.                предварительно концентрировать бактерии в исследуемой воде
      Для     иллюстрации последней группы методов ниже        на мембранных фильтрах центрифугированием или посевом в
представлена общая характеристика ускоренных методов           среды обогащения. В этом случае люминесцентно-
исследования воды. Наибольшее применение получил метод         серологическим методом удается обнаружить энтеробактерии
люминесцентно-серологический, который в настоящее время        при наличии в пробах воды даже единичных клеток в 1 мл.
рекомендуется для обнаружения в воде микроорганизмов           Метод флюоресцирующих антител рекомендуется применять
р.р.Escherichia, Salmonella, Shigella, Vibrio и др. Метод      при индикации в воде возбудителей туляремии, чумы, бацилл
иммунофлюоресценции основан на способности антител,            сибирской язвы. Однако люминесцентно-серологический метод
предварительно обработанных различными флюорохромами           является только сигнальным методом индикации патогенных
(флюоресцеина     изотиоцианат,    родамина    сульфохлорид,   бактерий в воде, и при положительном его результате должно
родамина сульфофторид и др.), адсорбироваться на поверхности   проводиться тщательное бактериологическое исследование
микробной клетки и вызывать ее свечение. Метод                 воды.
флюоресцирующих антител применяется в трех модификациях:             Для ускоренного обнаружения БГКП в воде был
прямой, непрямой и непрямой метод с добавлением                предложен радиоизотопный метод (Корш Л.Е., 1978). Принцип
комплемента. При прямом методе каплю исследуемой воды, в       метода заключается в определении количества БГКП по
которой предполагается наличие патогенных бактерий,            количеству метаболической двуокиси углерода, выделяемой при
помещают на предметное стекло, обрабатывают специфической      жизнедеятельности бактерий из элективных сред, меченных 14С.
к искомому микроорганизму люминесцирующей сывороткой и         Результат можно получить через 5-6 ч.
наблюдают под люминесцентным микроскопом. На темном
фоне препарата при положительном результате видна яркая             Тема 1. САНИТАРНО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ
флюоресценция по периферии клеток. При непрямом методе                            КОНТРОЛЬ ВОЗДУХА
обработка препаратов происходит в два этапа: специфической           Воздух не является благоприятной средой для
иммунной сывороткой выявляют присутствие соответствующих       жизнедеятельности микроорганизмов. Однако, попадая в воздух,
бактерий, на следующем этапе обнаруживают образовавшийся       многие микроорганизмы способны какое-то время находиться в
комплекс обработкой меченой иммунной сывороткой,               жизнеспособном состоянии. Среди них большая группа
содержащей антитела к глобулинам специфической сыворотки.      патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Человек,
Этот метод имеет существенное преимущество перед прямым,       болеющий инфекциями верхних дыхательных путей, выделяет
так как для выявления любых бактерий используется одна         микроорганизмы при разговоре, чихании, кашле и т.д. Через
меченая сыворотка против антител – глобулинов, содержащихся    воздух передается группа заболеваний, которая так и называется
в специфической сыворотке (как правило, глобулинов кролика).   - инфекции дыхательных путей с воздушно-капельным и
                                                               воздушно-пылевым механизмами передачи. К таким инфекциям

                                                         19    20