Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 8 стр.

UptoLike

Рубрика: 

15
используется. Существенным недостатком его является
невозможность подсчитать бактерии, когда образуются их
скопления или когда они «прилипают» к частицам исследуемого
субстрата, не удается подсчитать мелкие микроорганизмы, не
говоря уже о вирусах. И наконец, метод прямого подсчета не
дает возможности отличить живые микроорганизмы от
погибших. Создание автоматических приборов для регистрации
общей микробной обсемененности, таких как
фотоэлектрические и электронные счетчики, делает метод
прямого подсчета более перспективным.
Метод количественного посева исследуемого материала
на плотные питательные среды применяется наиболее часто. Из
приготовленных серийных десятикратных разведений
исследуемой жидкости или суспензии по 1 мл переносят в
стерильные чашки Петри (начиная с большего разведения,
каждое разведение отдельной пипеткой) и заливают
расплавленным и остуженным до 45—50
0
С мясопептонным
агаром - МПА (глубинный посев). Для равномерного
смешивания чашки слегка двигают по поверхности стола и
после застывания агара помещают в термостат.
После инкубации подсчитывают число выросших колоний и
с учетом разведения высчитывают число жизнеспособных
микробов в единице объема исследуемого объекта. Если посевы
выращивали при 30
0
С, то показателем общей обсемененности
исследуемого материала является КМАФАнМ (или МАФАнМ).
КМАФАнМ не определяют только у продуктов, при
производстве которых используют заквасочные культуры. В
зависимости от вида продукта и способа его производства этот
показатель может свидетельствовать об общем санитарно-
эпидемиологическом состоянии продукта, свежести или
начальной стадии порчи внешне доброкачественного продукта,
хотя во многих случаях метод считается приблизительным из-за
невозможности выявить все микроорганизмы в объекте на одной
питательной среде, т.к. их физиолого-биохимические свойства
различны. Кроме того, режим инкубации также не соответствует
требованиям всех микроорганизмов в ассоциации, не дают роста
микробы, находящиеся в комочках исследуемого объекта, а если
и наблюдается рост колоний, то, возможно, не из одной особи.
Наконец, часть микроорганизмов теряет способность к
16
размножению в силу антагонизма, конкуренции и других
причин. Несмотря на недостатки этого показателя, для многих
продуктов КМАФАнМ нормируется.
В обязательном порядке контролируются санитарно-
показательные микроорганизмы, обнаружение которых также
является косвенным показателем биологической контаминации
исследуемого материала патогенными микроорганизмами.
Превышение нормативов по допустимому содержанию
санитарно-показательной микрофлоры свидетельствует о
возможном присутствии тех или иных патогенных микробов.
Для количественной характеристики применяются две
группы методик: определения титра и индекса.
Титр - это тот наименьший объем исследуемого материала
(в миллилитрах) или весовое количество (в граммах), в котором
обнаружена хоть одна особь санитарно-показательного
микроорганизма. Например, для определения титра кишечной
палочки в воде засевают несколько разных объемов (от 100 до
0,1 или до 0,01 мл в зависимости от предполагаемой степени
загрязнения объекта) в жидкие сахарные питательные среды.
Размножение в них кишечных палочек регистрируется по
наличию брожения-расщепления углевода до кислоты и газа.
Пересев на плотные дифференциально-диагностические среды и
идентификация выросших колоний позволяют выяснить те
объемы, в которых присутствовала кишечная палочка. Затем с
помощью специальных таблиц, определяют коли-титр. Набор
таблиц входит в ГОСТ.
Индекс - количество особей санитарно-показательного
микроба, обнаруженного в определенном объеме (количестве)
исследуемого объекта. Для воды, молока, других жидких
продуктов - в 1 л, для почвы, и пищевых продуктов - в 1 г.
Индекс - величина, обратная титру, поэтому перерасчет титра в
индекс и обратно можно производить по формуле:
титр
индекс
индекс
титр
1000
;
1000
==
. (1)
Соответственно для почвы и пищевых продуктов:
титр
1
индекс;
индекс
1
титр ==
. (2)
Индекс чаще определяют путем применения мембранных
фильтров или посева различных разведений исследуемых
субстратов на питательные среды.
используется. Существенным недостатком его является            размножению в силу антагонизма, конкуренции и других
невозможность подсчитать бактерии, когда образуются их         причин. Несмотря на недостатки этого показателя, для многих
скопления или когда они «прилипают» к частицам исследуемого    продуктов КМАФАнМ нормируется.
субстрата, не удается подсчитать мелкие микроорганизмы, не           В обязательном порядке контролируются санитарно-
говоря уже о вирусах. И наконец, метод прямого подсчета не     показательные микроорганизмы, обнаружение которых также
                                                               является косвенным показателем биологической контаминации
дает возможности отличить живые микроорганизмы от              исследуемого материала патогенными микроорганизмами.
погибших. Создание автоматических приборов для регистрации     Превышение нормативов по допустимому содержанию
общей      микробной       обсемененности,     таких     как   санитарно-показательной микрофлоры свидетельствует о
фотоэлектрические и электронные счетчики, делает метод         возможном присутствии тех или иных патогенных микробов.
прямого подсчета более перспективным.                                Для количественной характеристики применяются две
      Метод количественного посева исследуемого материала      группы методик: определения титра и индекса.
на плотные питательные среды применяется наиболее часто. Из          Титр - это тот наименьший объем исследуемого материала
приготовленных      серийных    десятикратных     разведений   (в миллилитрах) или весовое количество (в граммах), в котором
исследуемой жидкости или суспензии по 1 мл переносят в         обнаружена хоть одна особь санитарно-показательного
стерильные чашки Петри (начиная с большего разведения,         микроорганизма. Например, для определения титра кишечной
каждое разведение отдельной пипеткой) и заливают               палочки в воде засевают несколько разных объемов (от 100 до
                                                               0,1 или до 0,01 мл в зависимости от предполагаемой степени
расплавленным и остуженным до 45—50 0С мясопептонным           загрязнения объекта) в жидкие сахарные питательные среды.
агаром - МПА (глубинный посев). Для равномерного               Размножение в них кишечных палочек регистрируется по
смешивания чашки слегка двигают по поверхности стола и         наличию брожения-расщепления углевода до кислоты и газа.
после застывания агара помещают в термостат.                   Пересев на плотные дифференциально-диагностические среды и
    После инкубации подсчитывают число выросших колоний и      идентификация выросших колоний позволяют выяснить те
с учетом разведения высчитывают число жизнеспособных           объемы, в которых присутствовала кишечная палочка. Затем с
микробов в единице объема исследуемого объекта. Если посевы    помощью специальных таблиц, определяют коли-титр. Набор
выращивали при 300С, то показателем общей обсемененности       таблиц входит в ГОСТ.
исследуемого материала является КМАФАнМ (или МАФАнМ).                Индекс - количество особей санитарно-показательного
КМАФАнМ не определяют только у продуктов, при                  микроба, обнаруженного в определенном объеме (количестве)
производстве которых используют заквасочные культуры. В        исследуемого объекта. Для воды, молока, других жидких
зависимости от вида продукта и способа его производства этот   продуктов - в 1 л, для почвы, и пищевых продуктов - в 1 г.
показатель может свидетельствовать об общем санитарно-         Индекс - величина, обратная титру, поэтому перерасчет титра в
эпидемиологическом состоянии продукта, свежести или            индекс и обратно можно производить по формуле:
начальной стадии порчи внешне доброкачественного продукта,                            1000             1000 . (1)
хотя во многих случаях метод считается приблизительным из-за                 титр =         ; индекс =
невозможности выявить все микроорганизмы в объекте на одной                          индекс            титр
питательной среде, т.к. их физиолого-биохимические свойства          Соответственно для почвы и пищевых продуктов:
различны. Кроме того, режим инкубации также не соответствует                          1                1
требованиям всех микроорганизмов в ассоциации, не дают роста
                                                                           титр =          ; индекс =      . (2)
                                                                                    индекс            титр
микробы, находящиеся в комочках исследуемого объекта, а если
                                                               Индекс чаще определяют путем применения мембранных
и наблюдается рост колоний, то, возможно, не из одной особи.
Наконец, часть микроорганизмов теряет способность к            фильтров или посева различных разведений исследуемых
                                                               субстратов на питательные среды.

                                                         15    16