Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 22 стр.

электрическая лампочка, которая освещает сетку. Чашка с              Прямой микроскопический метод определения общего
посевом, помещенная на стекло, снизу подсвечивается.                           количества микроорганизмов

                                                                                          Этот метод впервые был предложен
                                                                                     в 1932 г. А.С. Разумовым. Сущность
                                                                                     метода заключается в концентрации
                                                                                     бактерий на мембранных фильтрах (при
                                                                                     пропускании через них исследуемой
                                                                                     воды),     последующем     окрашивании
                                                                                     эритрозином и микроскопировании.
     Рис.7. Прибор для счета колоний в чашках.                                            Прямой метод удобен тем, что
                                                                                     результат,      т.    е.      количество
     Подсчет колоний ведется с помощью электропера                                   микроорганизмов в 1 мл воды, может быть
авторучки, соединенной с автоматическим счетчиком. При                               получен в течение нескольких часов.
каждом надавливании на ручку (в момент нанесения на                                  Поэтому рекомендуется использовать
обратной стороне дна чашки точки пером в месте нахождения                            прямой метод, если необходимо дать
колоний) при электроконтакте на автоматический счетчик          быструю санитарную оценку воды: при оценке процесса
поступает импульс, что регистрируется появлением очередной      естественного     самоочищения     водоемов,   при     оценке
цифры на табло счетчика.                                        эффективности работы очистных сооружений на всех этапах и
     Конечный результат – ОМЧ - рассчитывают по формуле:        т.д. Для фильтрования воды используют мембранные фильтры,
                                 К ⋅Р,      (3)                 фильтр Зейтца (рис.8) или специальный аппарат Долгова-
                        ОМЧ =                                   Разумова. Мембранные фильтры - тонкие (0,1-0,5 мм) круглые
                                  V
где ОМЧ - общее микробное число, колонийобразующих единиц       пластинки из нитроклетчатки или ацетилцеллюлозы диаметром
(КОЕ) микроорганизмов в 1 мл исследуемой воды;                  35 мм. В зависимости от размера пор различают фильтры марки
      К- количество колоний на чашке Петри;                     Ф (фильтрующие): № 1 - 350 нм; № 2 - 500нм; № 3 - 700 нм; № 4
      Р- фактор разведения;                                     - 900 нм; № 5 -1200 нм.
      V- объем, засеваемый на чашку, мл.                              Фильтры с осевшими на них микроорганизмами
                                                                высушивают, помещая на фильтровальную бумагу в чашках
      Вычисляют среднеарифметическую величину для каждого       Петри в термостат или в сушильный шкаф, а затем окрашивают
разведения (при засеве на 2 и более чашки Петри параллельно).   карболовым эритрозином (5 г эритрозина на 100 мл 5% раствора
Если колоний выросло так много, что они не поддаются счету,     фенола). При окрашивании фильтры кладут нижней
или наблюдается рост расплывчатых колоний по всей               поверхностью в чашку Петри на фильтровальную бумагу,
поверхности агара, то в результате отмечают «сплошной           предварительно смоченную эритрозином, и выдерживают в
ползучий рост».                                                 течение 1 ч (можно до 18 ч) с закрытой крышкой. Окраска и
                                                                последующая промывка препарата происходит через поры
                                                                мембранного фильтра. Остатки эритрозина отмывают, помещая
                                                                фильтр в чашку Петри на фильтровальную бумагу, смоченную
                                                                дистиллированной водой. Так делают 3-5 раз, перекладывая
                                                                фильтр из одной чашки в другую на бумагу, смоченную

                                                          43    44