Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 24 стр.

переносят на среду Эндо в чашку Петри. Фильтр накладывают         индекс ОКБ должен быть не более 3, у воды плавательного
вверх поверхностью, на которой осели бактерии, избегая            бассейна – не более 10.
появления пузырьков воздуха между фильтром и средой. На                Метод мембранных фильтров является современным,
одну чашку можно разместить 4 фильтра, под каждым на дне          точным, менее трудоемким и более дешевым в сравнении с
чашки следует надписать объем воды, номер пробы и число.          титрационным методом. Он удобен и тем, что позволяет
Если вода мутная, то фильтрование ведется сразу через два         концентрировать бактерии, содержащиеся в значительном
фильтра: предварительный фильтр № 6 (для задержания               объеме воды на небольшой поверхности фильтра. Однако одним
крупных частиц) помещают на фильтр № 2. После фильтрования        из самых существенных недостатков метода является то, что
оба фильтра переносят на среду Эндо. Чашки с фильтрами            этим методом выявляется меньшее количество бактерий в
помещают в термостат и инкубируют при температуре 37°С в          сравнении с титрационным. Для большей точности
течение 24 ч. При окончательном результате учитывают              рекомендуется исследование воды проводить параллельно
колонии, выросшие на обоих фильтрах.                              обоими методами.
      При наличии в воде БГКП (ОКБ) на фильтрах появляется             Титрационный метод исследования воды. Метод основан
рост типичных для этих бактерий колоний: темно-красные с          на накоплении бактерий после посева установленного объема
металлическим блеском или красные, розовые с красным              воды в жидкую питательную среду, с последующим пересевом
центром, имеющие четкий отпечаток на обратной стороне             на дифференциально-диагностическую среду и идентификации
фильтра. Бактерии из таких колоний окрашивают по Граму и          колоний по культуральным и биохимическим тестам.
микроскопируют. Окраску по Граму можно заменить на тест                Объем засеваемой воды зависит от характера исследуемого
Грегерсена (приложение 3). С культурой грамотрицательных          объекта, но обязательно посев ведется в 2-3, а в некоторых
бактерий лактозополо-жительных колоний ставят оксидазный          случаях- в 5-ти повторностях.
тест (приложение 3) для дифференциации бактерий семейства               Объемы воды выбирают с таким расчетом, чтобы в одном
Enterobacteriaceae от Pseudomonadaceae (последние являются        из разбавлении получить хотя бы один отрицательный
оксидазообразующими      бактериями).    Оставшуюся    часть      результат.(табл.5).
оксидазоотрицательной Гр(-) изолированной колонии засевают в                                                         Таблица 5
пробирку с полужидкой лактозной средой и инкубируют при                      Схема посева воды из различных объектов
370С, 48 ч. При появлении кислоты и газа за более короткий                       при работе титрационным методом
промежуток времени, результат считают положительным.
      Индекс ОКБ (БГКП) рассчитывают по формуле:                  Объект исследования             Объемы засеваемой воды (в мл) для
                                К ⋅ 1000   , (5)                                                  определения
                 индекс      =
                                    V                                                             БГКП, ЛПК, Е. coli          энтерококков
где К- количество проверенных на принадлежность к ОКБ             Вода питьевая                   3 повторности по 100, 10, 1 2 или З
(БГКП) колоний на фильтрах;                                       централизованного                                           повторности
      V- объем профильтрованной воды через фильтры, на            водоснабжения                                               по 100, 10, 1
которых велся учет.                                               Вода      нецентрализованного   50, 5 повторностей по 10, 1 2 или З
      Например, профильтровано по 100 мл в трех повторностях,     водоснабжения и плавательных     или 2 повторности по 100,  повторности
на одном фильтре выросло 5 колоний, на другом - 2, на третьем -   бассейнов                       10, 1 и 0,1                 по 100, 10, 1
                                                                  Водные       объекты,      не   50, 5 повторностей по 10, 1 50, 5
нет роста.
                                                                  загрязняемые        сточными    или 2—3 повторности по 10; повторностей
      Индекс ОКБ будет равен: [(5 + 2) ×1000] :300 = 23 КОЕ       водами                          1; 0,1; 0,01                по10, 1 или 2-3
(колонийобразующих единиц). Для перевода индекса в титр                                                                       повторности по
используют формулу (1), для рассмотренного случая:                                                                            10; 1;0,1; 0,001
Титр=1000:23=43,5мл. В соответствии с ГОСТ, у воды питьевой

                                                            47    48