Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 25 стр.

UptoLike

Рубрика: 

49
Продолжение таблицы 5
Водоемы, загрязняемые
сточными водами
2-3 повторности по
1; 0,1; 0,01; 0,001 или
1; 0,1; 0,01; 0,001;
0,0001; 0,00001
2-3 повторности
по
10; 1; 0,1; 0,01
Сточные воды до очистки
и обеззараживания
От 0,01 до
0,000000001
От 0,1 до
0,00000001
Сточные воды после
очистки и обеззараживания
От 0,1 до 0,00000001 От 0,1 до
0,000001
Посев воды производится в глюкозопептонную среду
(ГПС): 100 мл воды - в 10 мл концентрированной среды, 50 мл -
в 15 мл концентрированной среды, 10 мл - в 1 мл также
концентрированной среды; 1 мл и последующие разведения - в
10 мл глюкозопептонной среды нормальной концентрации.
Большие объемы воды засеваются во флаконы или колбы,
меньшие - в пробирки. Посевы инкубируют в термостате в
течение суток при температуре 37°С.
Из пробирок с посевами, в которых наблюдается
помутнение (а также образование кислоты и газа), делают высев
на сектора в чашки со средой Эндо. Посевы выдерживают в
термостате при температуре 37°С в течение 16-18 ч. При
наличии на среде Эндо характерных для БГКП (ОКБ) колоний
(красных с металлическим блеском) следует провести все тесты,
перечисленные выше. Положительный ответ на наличие БГКП
дается в том случае, если наблюдается рост характерных
колоний, образованных оксидазоотрицательными, Гр(-)
бактериями, сбраживающих лактозу при 37
0
С с образованием
кислоты и газа. Обращают внимание также на отпечаток,
окрашенный в красный цвет, на среде после снятия изучаемой
колонии. Таким образом, положительный ответ выдается через
40—42 ч. Так же, как и при определении БГКП методом
мембранных фильтров, если на среде Эндо выросли
лактозоотрицательные колонии (розовые, бесцветные, мелкие
красные), то их принадлежность к БГКП (ОКБ) подтверждается
отрицательной окраской по Граму, отрицательным оксидазным
тестом, способностью ферментировать лактозу до кислоты и
50
газа при температуре 37°С и отсутствием протеолитической
активности (при посеве на среду Эндо с молоком).
Результат выражается в виде индекса (титра) БГКП или
ОКБ, цифровое выражение которых определяют по таблице 6.
Таблица 6
Расчет наиболее вероятного числа бактерий в 1л воды
Число
положительных
результатов из 3
объемов
Число
положительных
результатов из 3
объемов
по
100мл
по
10
мл
по
1 мл
индекс ОКБ (БГКП)
титр ОКБ (БГКП)
по
100мл
по
10
мл
по
1 мл
индекс ОКБ (БГКП)
титр ОКБ (БГКП)
0 0 0 < 3 > 333 3 0 0 23 43
0 0 1 3 333 3 0 1 39 26
0 1 0 3 333 3 0 2 64 16
1 0 0 4 250 3 1 0 43 23
1 0 1 7 143 3 1 1 75 13
1 1 1 11 91 3 1 2 120 8
1 2 0 11 91 3 2 0 93 11
2 0 0 9 111 3 2 1 150 7
2 0 1 14 72 3 2 2 210 5
2 1 0 15 67 3 3 0 240 4
2 1 1 20 50 3 3 1 460 2
2 2 0 21 48 3 3 2 1100 0,9
2 2 1 28 86 3 3 3 >1100 <0,9
Определение термотолерантных колиформных
бактерий (ТКБ)
Из всех бактерий, входящих в состав БГКП, наибольшее
санитарно-показательное значение имеют микроорганизмы рода
Escherichia. По способности расщеплять лактозу при
температуре 37°С из БГКП (ОКБ) принято выделять Гр(-)
бактерии, которые способны ферментировать лактозу при
температуре 44,5°С. К ним относится Е. coli, не растущая на
                                                  Продолжение таблицы 5      газа при температуре 37°С и отсутствием протеолитической
Водоемы,         загрязняемые 2-3 повторности по          2-3 повторности    активности (при посеве на среду Эндо с молоком).
сточными водами               1; 0,1; 0,01; 0,001 или     по
                                                                                  Результат выражается в виде индекса (титра) БГКП или
                              1; 0,1; 0,01; 0,001;        10; 1; 0,1; 0,01
                              0,0001; 0,00001                                ОКБ, цифровое выражение которых определяют по таблице 6.
Сточные воды до очистки       От 0,01 до                  От 0,1 до
и обеззараживания             0,000000001                 0,00000001                                                             Таблица 6
Сточные воды после            От 0,1 до 0,00000001        От 0,1 до                Расчет наиболее вероятного числа бактерий в 1л воды
очистки и обеззараживания                                 0,000001
                                                                                       Число                                                    Число




                                                                                                     индекс ОКБ (БГКП)




                                                                                                                                                              индекс ОКБ (БГКП)
                                                                                                                         титр ОКБ (БГКП)




                                                                                                                                                                                  титр ОКБ (БГКП)
                                                                                  положительных                                            положительных
      Посев воды производится в глюкозопептонную среду                            результатов из 3                                         результатов из 3
                                                                                      объемов                                                  объемов
(ГПС): 100 мл воды - в 10 мл концентрированной среды, 50 мл -
в 15 мл концентрированной среды, 10 мл - в 1 мл также                           по        по по                                              по    по по
концентрированной среды; 1 мл и последующие разведения - в                    100мл       10 1 мл                                          100мл   10 1 мл
10 мл глюкозопептонной среды нормальной концентрации.                                     мл                                                       мл
Большие объемы воды засеваются во флаконы или колбы,                               0       0   0            <3           > 333               3      0   0       23                   43
меньшие - в пробирки. Посевы инкубируют в термостате в                             0       0   1             3            333                3      0   1       39                   26
течение суток при температуре 37°С.                                                0       1   0             3            333                3      0   2       64                   16
     Из пробирок с посевами, в которых наблюдается                                 1       0   0             4            250                3      1   0       43                   23
помутнение (а также образование кислоты и газа), делают высев                      1       0   1             7            143                3      1   1       75                   13
на сектора в чашки со средой Эндо. Посевы выдерживают в
                                                                                   1       1   1            11            91                 3      1   2      120                    8
термостате при температуре 37°С в течение 16-18 ч. При
наличии на среде Эндо характерных для БГКП (ОКБ) колоний                           1       2   0            11            91                 3      2   0       93                   11
(красных с металлическим блеском) следует провести все тесты,                      2       0   0             9            111                3      2   1       150                   7
перечисленные выше. Положительный ответ на наличие БГКП                            2       0   1            14            72                 3      2   2      210                    5
дается в том случае, если наблюдается рост характерных                             2       1   0            15            67                 3      3   0      240                    4
колоний,    образованных     оксидазоотрицательными,     Гр(-)                     2       1   1            20            50                 3      3   1      460                    2
бактериями, сбраживающих лактозу при 370С с образованием                           2       2   0            21            48                 3      3   2      1100                 0,9
кислоты и газа. Обращают внимание также на отпечаток,                              2       2   1            28            86                 3     3    3     >1100                 <0,9
окрашенный в красный цвет, на среде после снятия изучаемой
колонии. Таким образом, положительный ответ выдается через
                                                                                    Определение термотолерантных колиформных
40—42 ч. Так же, как и при определении БГКП методом
                                                                                                   бактерий (ТКБ)
мембранных фильтров, если на среде Эндо выросли
                                                                             Из всех бактерий, входящих в состав БГКП, наибольшее
лактозоотрицательные колонии (розовые, бесцветные, мелкие                    санитарно-показательное значение имеют микроорганизмы рода
красные), то их принадлежность к БГКП (ОКБ) подтверждается                   Escherichia. По способности расщеплять лактозу при
отрицательной окраской по Граму, отрицательным оксидазным                    температуре 37°С из БГКП (ОКБ) принято выделять Гр(-)
тестом, способностью ферментировать лактозу до кислоты и                     бактерии, которые способны ферментировать лактозу при
                                                                             температуре 44,5°С. К ним относится Е. coli, не растущая на

                                                                       49    50