Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 27 стр.

и инкубируют при температуре 37°С в течение 24 ч. На среде      пробирках появился рост, то также делают высев на молочно-
Сланеца вырастают характерные колонии: некрупные,               ингибиторную среду. После 24 ч инкубирования в термостате
выпуклые, круглые, темно-вишневые или розовые с темно-          учитывают     колонии     аспидно-черные,      выпуклые,      с
вишневым центром (окраска колоний зависит от степени            металлическим блеском (S. faecalis), а также колонии,
восстановления ТТХ). На желчной среде колонии плоские,          окруженные узкой зоной просветления с выпадением по
крупные с ровными краями, белые с кремовым или розовым          периферии осадка пара-казеина (S. faecium, биовар liquefaciens),
оттенком, а также малиновые. Малиновый цвет характерен для      мелкие серые колонии (S. faecium, биовар durans). Из части
колоний S. faecalis. Принадлежность колоний к энтерококкам      колоний (выборочно) следует приготовить мазки, окрасить по
подтверждается микроскопией мазков, окрашенных по Граму, и      Граму. Наличие энтерококков дает возможность дать
отсутствием каталазной активности (приложение 3).               заключительный ответ. Индекс энтерококков определяют по
      Подсчитывают количество выросших колоний и                таблице 5.
вычисляют число энтерококков в исследуемой воде исходя из             При определении энтерококков методом прямого посева (в
объемов воды, профильтрованных через мембранные фильтры.        основном при исследовании сточных вод) делают посевы
Общее количество колоний делят на объем воды и умножают на      исследуемой воды непосредственно на чашки Петри со средой
1000.                                                           Сланеца или желчной средой в 2 или 5 повторностях. Обычно
      Сущность       титрационного    метода      определения   берут 1 мл, 0,5, 0,2 и 0,1 мл из каждого десятикратного
энтерококков заключается в посеве различных объемов             разведения. Засеваемую воду тщательно втирают шпателем в
исследуемой воды в жидкую элективную среду для накопления       поверхность питательной среды до полного впитывания воды.
микроорганизмов с последующим высевом на плотную                Идентификация и подсчет энтерококков проводятся так же, как
молочно-ингибиторную среду для получения отдельных              при определении титрационным методом.
колоний, их идентификации и подсчета индекса энтерококков.
Титрационный метод дает более точные количественные данные                        Определение споровых
о содержании энтерококков в воде. Объемы воды выбирают с                       сульфитредуцирующих клостридий
таким расчетом, чтобы при наиболее высоком разведении                 Сульфитредуцирующие клостридии (представитель этой
наблюдался один или несколько отрицательных результатов         группы микроорганизмов - Clostridium perfringens) -
(при этом следует ориентироваться на таблицу 10). Каждый        спорообразующие анаэробные палочковидные микроорганизмы,
объем или разбавление исследуемой воды засевают в 2 или 3       редуцирующие сульфит натрия на железо-сульфитном агаре при
повторностях. Объемы воды 100 мл и 10 мл засевают в 100 и 10    температуре 440С в течение 16-18 ч. Метод основан на
мл (соответственно) щелочно-полимиксиновой среды двойной        выращиван6ии посевов в железо-сульфитном агаре в условиях,
концентрации, 1 мл и по 1 мл десятикратных разведении           приближенных к анаэробным, и подсчете числа черных колоний.
засевают в 5 мл этой же среды обычной концентрации.                   Количественно эти микроорганизмы в воде можно
Выдерживают в термостате в течение 24 ч при температуре         определить методом мембранной фильтрации или прямым
37°С, затем из всех колб и пробирок, в которых наблюдается      посевом. В качестве питательной среды для выделения и
рост бактерий (помутнение, изменение цвета среды с синего на    подсчета    сульфитредуцирующих       клостридий    обычно
зеленый или желтый), делают высевы на сектора в чашки Петри     используют среду Вильсона-Блера (железосульфитный агар).
с молочно-ингибиторной средой. Пробирки с посевами в                  Перед посевом пробу воды прогревают на водяной бане
щелочно-полимиксиновую среду, в которых еще нет признаков       при температуре (75±5)0С в течение 15 мин для исключения
роста, оставляют на сутки в термостате, и если в каких-нибудь   вегетативных форм. При исследовании хлорированной воды, ее
                                                          53    54