Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 28 стр.

можно не прогревать. Применяя метод мембранной фильтрации,      следующих тест-организмов (по международным стандартам):
пробу воды определенного объема пропускают через фильтр,        мутант Salmonella tuphimurium, непатогенный для человека,
который затем помещается в пробирку с подготовленной            штамм Escherichia coli К-12 Hfr из соответствующей коллекции
расплавленной питательной средой верхней стороной внутрь        культур ATCC 23631 или NTCT12486, штамм E.coli рода CN,
(пробирка с питательной средой после посева должна быть         называемый WG5, а также бактериофаги MS2, NCTC12487 или
немедленно охлаждена в холодной воде во избежание попадания     АТСС 15597 для контроля чувствительности тест-организмов.
воздуха) или в чашку Петри на поверхность питательной среды,          Международным стандартом регламентируются методы
которая затем заливается той же питательной средой толстым      определения бактриофагов РНК типа F и соматических
слоем.                                                          бактриофагов,       которые        позволяют        определить
     Метод прямого посева предполагает посев в стерильные       присутствие/отсутствие бактериофагов, а также дать их
пробирки 20 мл воды следующим образом: по 10мл в 2              количественную оценку (ИСО 10705-1).
пробирки (объемом не менее 30 мл), или по 5 мл в 4 пробирки           Бактериофаги РНК типа F - это бактериальные вирусы,
(объемом не менее 15 мл).                                       способные инфицировать определенный штамм хозяина с
     Сверху посевы воды заливают горячим (75-800С)              помощью F-фимбрий или половых фимбрий. Соматические
железосульфитным агаром в количестве, превышающем объем         бактериофаги являются непатогенными для человека, однако
воды в 2 раза. Среду заливают по стенке пробирки, стараясь не   являются устойчивыми к внешним факторам, особенно к
допустить образования пузырьков воздуха. Пробирки с             высушиванию.
посевами быстро охлаждают в стакане с холодной водой,                 Прямой метод выявления бактериофагов. Данный метод
инкубируют при 440С в течение 24 ч.                             представлен в методических указаниях МЗ РФ- МУК 4.2.671-97
     Количественному учету подлежат только те посевы, где       и    применяется     при    определении     исследований    по
получены изолированные колонии. Подсчитывают черные             эпидпоказаниям или в случае необходимости получения
колонии, выросшие как на фильтре, так и в толще питательной     результатов в короткие сроки.
среды. Результат анализа выражают числом колониеобразующих            Ход определения. За 18-24 часа перед проведением
единиц (КОЕ) спор сульфит-редуцирующих клостридий в             анализа необходимо сделать посев тест-культуры E.coli K12
определенном объеме воды (подвергнутой анализу)                 F+(Рос.гос.ин-т мед.и биол.препаратов им. Л.А. Тарасевича) на
                                                                косяк с питательным агаром (МПА). Перед проведением анализа
                    Определение бактериофагов                   сделать смыв с косяка 5 мл стерильной водопроводной воды и
      Присутствие бактериофагов в воде, говорит о фекальном     по стандарту мутности приготовить взвесь тест-организма в
загрязнении,     и является индикатором или сигналом о          концентрации 109 бакт. клеток/мл.
возможном присутствии энтеровирусов. Поэтому методы                   Расплавить и остудить до 450С 2%-ный питательный агар.
определения бактериофагов (в т.ч. и колифагов) включены в       Исследуемую воду 100 мл внести в 5 стерильных чашек Петри
методические указания Минздрава России (2001г.) и               (по 20 мл в каждую). В питательную среду добавить смыв E.coli
регламентированы Международными стандартами (ИСО 10705-         (из расчета 1,5 мл на 150 мл агара) и хорошо перемешать.
1:1995; 10705-2:2000; 10705-3; 10705-4).                        Полученной смесью залить по 30 мл сначала пустую чашку
      Существует несколько методов количественного и            Петри (контроль), а затем все чашки, содержащие исследуемую
качественного определения бактериофагов в воде.                 воду. Содержимое чашек перемешивают вращательными
      Все методы основаны на чувствительности музейных          движениями. После застывания питательной среды чашки
культур микроорганизмов и предполагают использование

                                                          55    56