Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 34 стр.

микроорганизмы из комочков земли и с поверхности почвенных       среду Эндо. Метод прямого посева используется и при посеве
частиц. Из первого разведения (1:10) почвенной суспензии         менее загрязненных почв, в этом случае берется почвенная
готовят ряд последующих 10-кратных разведений: от 1:10 до        суспензия в разведениях от 1:10 до 1:1000. Посевы выращивают
1:1000 при исследовании чистых почв и до 1:1000000 и более -     в термостате при температуре 37°С в течение 24 ч. Дальнейшая
при исследовании сильно загрязненных почв.                       идентификация выросших колоний ведется по общепринятой
         Определение бактерий группы кишечных палочек            методике.
      При исследовании почв на присутствие БГКП                                Определение общей численности
рекомендуется применение титрационного метода при                                   сапрофитных бактерий
предполагаемой невысокой степени фекального загрязнения,               Общее число сапрофитных бактерий определяется
метод мембранных фильтров используется при анализе               количеством микроорганизмов, обнаруживаемым в 1 г
малозагрязненных почв. При высокой степени фекального            исследуемой почвы. Этот показатель имеет относительное
загрязнения рекомендуется делать прямой посев почвенной          значение, так как свидетельствует о биологическом состоянии
суспензии (1:10) на среду Эндо.                                  почвы в момент исследования. Санитарное значение
      Титрационный метод. Из приготовленных разведении           численности сапрофитных бактерий учитывается в комплексе с
почвенной суспензии делают посевы во флаконы и пробирки с        другими санитарно-микробиологическими показателями, исходя
жидкой питательной средой Кесслера: 10 мл (из разведения 1:10)   из особенностей исследуемой почвы.
- в 50 мл среды, по 1 мл из последующих разведении - в 9 мл            Для определения общей численности почвенных
среды. Посевы инкубируют в течение 48 ч при температуре          сапрофитов могут быть использованы два метода: посев на
37°С. При отсутствии во флаконе и пробирках роста,               плотные питательные среды и метод прямой микроскопии.
характеризующегося газообразованием и помутнением, дается              Посев почвенной суспензии производят на МПА
отрицательный ответ на присутствие БГКП. Если в засеянных        глубинным способом. Разведения выбирают с учетом
сосудах обнаруживается рост в виде помутнения среды или          загрязненности почвы. Посевы инкубируют при 28-30°С в
помутнения и газообразования, следует сделать высев в чашки      течение 72 ч и подсчитывают количество выросших колоний.
Петри со средой Эндо, инкубировать 24 ч при температуре 37°С.    Для подсчета берут такие разведения почвенной суспензии, при
Дальнейшей идентификации (аналогично определению БГКП в          которых на чашках вырастает от 50 до 150 колоний. Если
воде) подвергаются типичные для Escherichia красные или          вырастает более 150 колоний, то ведется счет на 1/4 площади
розовые с металлическим блеском колонии. Результат               чашки с последующим перерасчетом на всю площадь. Из суммы
выражается в коли-индексе, т. е. количество БГКП,                колоний,    подсчитанных      на    всех    чашках,   выводят
обнаруженных в 1 г почвы.                                        среднеарифметическое и затем определяют число колоний на 1 г
      Метод мембранных фильтров. Метод применяется как           почвы (с учетом разведений).
ускоренный для определения БГКП. Почвенную суспензию 1:10              Метод прямой микроскопии почвы является очень
центрифугируют при 2000 об/мин в течение 5 мин для               трудоемким и требует специальной аппаратуры. Чаще всего
осаждения крупных частиц, затем 5-10 мл суспензии фильтруют      пользуются методом капилляроскопии по Б.В. Перфильеву и
через мембранные фильтры № 3. Дальнейший ход исследования        Д.Г. Габе. Для микроскопии к 1 мл почвенной суспензии в
такой же, как при определении БГКП в воде.                       разведении 1:10 добавляют 1-2 капли 1% раствора акридинового
      Прямой посев почвы. Почва из мест интенсивного             оранжевого и затем помещают каплю суспензии в специальную
фекального загрязнения засевается в количестве 0,1 или 0,05 мл   капиллярную камеру. Капилляр кладут на предметное стекло и
суспензии, разведенной от 1:10 до 1:1 000000, в чашки Петри на   фиксируют парафином. Подсчет микроорганизмов ведется с

                                                           67    68