Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 35 стр.

помощью люминесцентного микроскопа. Последующим                      Использование сред накопления. По 1 мл прогретых и
перерасчетом устанавливается количество микроорганиз-мов в 1   нативных разведений почвенной суспензии высевают в
г почвы.                                                       пробирки с жидкими и полужидкими питательными средами,
                   Определение перфрингенс-титра               предварительно     регенерированными    кипячением     (среда
       Присутствие Сl. perfringens в почве указывает на        Клодницкого, Китта-Тароцци, бульон Мартена с ватой). После
фекальное загрязнение ее и имеет определенное индикаторное     18—20 ч инкубации в термостате при 37°С делают высев в среду
значение по отношению к группе патогенных клостридий (С.       Вильсона-Блера или СПН. Дальнейшее исследование ведется по
tetani, С. botulinum), которые также попадают в почву с        описанной выше методике.
испражнениями       человека    и   животных.   Определение                  Определение термофильных бактерий
перфрингенс-титра является важным критерием для санитарной           Степень фекального загрязнения почвы можно определить
оценки почвы и ее самоочищения, так как при фекальном          по количеству термофильных бактерий, температурный
загрязнении почвы уже через 4-5 месяцев E.coli исчезают, а     оптимум развития которых равен 58-60°С. Термофилы
Сl.perfringens обнаруживаются в титре 0,01 г.                  представлены        в      основном       спорообразующими
       Предложено       несколько     методов    определения   грамположительными бациллами и актиномицетами, активно
перфрингенс-титра.                                             размножаются в компостных кучах, навозе. Поэтому можно
       Посев почвенной суспензии в среду Вильсона-Блера. Из    заключить, что почвы, в которых обнаруживается большое
приготовленных разведений почвенной суспензии (от 1:10 до      количество эшерихий и термофилов, были удобрены навозом
1:1000000) переносят по 1 мл в два параллельных ряда           или компостом. Почва, содержащая много эшерихий и
стерильных пробирок. Один ряд пробирок с разведениями          незначительное количество термофилов, считается загрязненной
суспензии прогревают при температуре 80°С в течение 15 мин     фекалиями, так как флора кишечника человека и животных
(для подавления размножения сопутствующей вегетативной         крайне бедна термофилами. Термофильные микроорганизмы не
микрофлоры почвы). Затем в пробирки обоих рядов вносят по 9-   свойственны незагрязненным почвам. Для обнаружения
10 мл среды Вильсона - Блера, приготовленной непосредственно   термофилов делают посев разведений почвенной суспензии (от
перед употреблением. Суспензию перемешивают со средой,         1:10-1:1000 000) на 2-3 параллельные чашки с МПА, разлитые
вращая пробирки между ладонями рук, затем для быстрого         более толстым слоем, чем обычно (поверхностный посев).
застывания агара и выхода кислорода из среды пробирки          Инкубируют при температуре 60°С в течение 24 ч. Количество
помещают под струю холодной воды. Инкубируют в термостате      выросших колоний подсчитывают, перерасчет термофилов на 1
при температуре 43°С в течение 24 ч, но уже через 2—3 ч при    г почвы ведется, как при определении общей численности
положительном результате можно наблюдать в толще агара         сапрофитов в почве.
образование круглых колоний черного цвета, разрывающих агар                 Определение нитрифицирующих бактерий
в месте газообразования. В мазках, приготовленных из черных          Одним из показателей процесса самоочищения почвы
колоний, видны характерные грамположительные палочки.          являются нитрифицирующие бактерии              (Nitrosomonas,
       В 1968 г. Г.И. Сидоренко и Ю.И. Пивоваровым             Nitrobacter), участвующие в превращении аммонийных
предложено использовать вместо среды Вильсона-Блера            соединений в азотистую и азотную кислоты. Титр
сульфит-полимиксин-неомициновую среду (СПН). Добавленные       нитрификаторов определяют посевом разведений почвенной
к ней антибиотики подавляют сопутствующую флору, поэтому       суспензии от 1:100 до 1:10000 во флаконы с жидкой
выросшие в этом агаре при температуре 44-45°С колонии не       минеральной средой Виноградского. В качестве контроля в
требуют дальнейшей идентификации. Время анализа -10—12 ч.      термостат помещают два флакона с незасеянной средой. Посевы

                                                         69    70