Методические указания по курсам "Санитарная микробиология", "Санитарно-микробиологический контроль на производстве", КПВ "Микробиология". Инешина Е.Г - 36 стр.

UptoLike

Рубрика: 

71
инкубируют при температуре 28°С в течение 14—15 сут. На 5-7-
й день можно проверить образование азотистой или азотной
кислоты с помощью качественной пробы с дифениламином. При
добавлении к капле среды (помещенной на стеклянную
пластинку) нескольких капель раствора дифениламина (в
концентрированной серной кислоте) появляется синее
окрашивание, что указывает на присутствие нитратов. Среда в
контрольных флаконах не должна давать изменения окраски.
Определение в почве сальмонелл и шигелл
Загрязнение почвы сальмонеллами происходит в
результате непосредственного попадания фекалий,
преимущественно животных, в меньшей степени - человека.
Практически у всех домашних и многих диких животных
сальмонеллы обнаружены как комменсалы и как возбудители
острых сальмонеллезов. Шигеллы попадают в почву с
испражнениями человека.
Все представители рода Salmonella являются потенциально
патогенными для человека, вызывая заболевания, разнообразные
по клинической картине (от тяжелых сальмонеллезов до
бактерионосительства) и продолжительности. Часто заболевание
протекает легко, что приводит к быстрому выздоровлению,
поэтому больные не обращаются к врачу, оставаясь вне поля
зрения санитарно-эпидемиологической службы и становясь
возможными носителями сальмонелл. Конечно, человек
выделяет бактерий значительно меньше по сравнению с
животными, но выделяемые им сальмонеллы адаптированы к его
организму и потому эпидемически более опасны. Для
определения сальмонелл в почве могут быть использованы два
метода: посев в среду накопления и метод коагуляции с
последующим высевом на дифференциально-диагностические
среды.
Первый метод более простой: для обнаружения
сальмонелл в подготовленную почвенную суспензию вносят
ингредиенты магниевой среды «М» (из расчета объема
суспензии), инкубируют при температуре 37°С в течение 18-20ч.
Затем делают высев на висмут-сульфитную среду (обычно 3-5
чашек). Идентификация выросших колоний проводится по
72
методике определения сальмонелл. Шигеллы обнаруживают
параллельно - посевом в селенитовую среду.
При выделении сальмонелл из почвы методом коагуляции
и центрифугирования по Фикеру к 500 мл почвенной суспензии
добавляют 1,7 мл 10%-ного стерильного раствора сульфата
железа и 2 мл 10%-ного стерильного раствора бикарбоната
натрия (для подщелачивания, которое способствует коагуляции).
Суспензию тщательно взбалтывают и ставят в холодильник на 1
ч для образования хлопьев, прозрачную жидкость сливают, а
осадок и надосадочную жидкость с хлопьями переносят в
центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 5000
об/мин. После центрифугирования жидкость над осадком
сливают, а осадок обрабатывают 1 мл 25%-ного раствора
виннокислого калия (добавляя по каплям до полного
растворения осадка) и делают высев на чашки с висмут-
сульфитным агаром и средой Плоскирева. Параллельно
оставшийся осадок заливают желчным бульоном. Посевы
помещают в термостат при температуре 37°С. Для выявления
сальмонелл из желчного бульона через 5 и 20 ч делают высев на
дифференциально-диагностические среды. Дальнейшая
идентификация сальмонелл и шигелл ведется по обычной схеме.
Для обнаружения сальмонелл и шигелл можно
непосредственно исходную почвенную суспензию фильтровать
через мембранные фильтры, затем их переносят на
дифференциально-диагностические среды для подращивания.
Патогенные микроорганизмы в почве можно
обнаруживать, используя иммунолюминесцентный метод,
постановку биопробы (при выявлении клостридий столбняка и
ботулизма).
Санитарно-микробиологическая оценка почвы. Ее
производят по комплексу показателей: общее количество
сапрофитных микроорганизмов и наличие санитарно-по-
казательных микробов - БГКП, перфрингенс и др. Большая
численность почвенной сапрофитной микрофлоры
свидетельствует об органическом загрязнении почвы, при
микробной контаминации преобладают санитарно-
показательные микроорганизмы. В естественных условиях, как
правило, микробное и органическое загрязнение происходит
инкубируют при температуре 28°С в течение 14—15 сут. На 5-7-    методике определения сальмонелл. Шигеллы обнаруживают
й день можно проверить образование азотистой или азотной        параллельно - посевом в селенитовую среду.
кислоты с помощью качественной пробы с дифениламином. При             При выделении сальмонелл из почвы методом коагуляции
добавлении к капле среды (помещенной на стеклянную              и центрифугирования по Фикеру к 500 мл почвенной суспензии
пластинку) нескольких капель раствора дифениламина (в           добавляют 1,7 мл 10%-ного стерильного раствора сульфата
концентрированной серной кислоте) появляется синее              железа и 2 мл 10%-ного стерильного раствора бикарбоната
окрашивание, что указывает на присутствие нитратов. Среда в     натрия (для подщелачивания, которое способствует коагуляции).
контрольных флаконах не должна давать изменения окраски.        Суспензию тщательно взбалтывают и ставят в холодильник на 1
             Определение в почве сальмонелл и шигелл            ч для образования хлопьев, прозрачную жидкость сливают, а
      Загрязнение почвы сальмонеллами происходит в              осадок и надосадочную жидкость с хлопьями переносят в
результате     непосредственного       попадания     фекалий,   центрифужные пробирки и центрифугируют 5 мин при 5000
преимущественно животных, в меньшей степени - человека.         об/мин. После центрифугирования жидкость над осадком
Практически у всех домашних и многих диких животных             сливают, а осадок обрабатывают 1 мл 25%-ного раствора
сальмонеллы обнаружены как комменсалы и как возбудители         виннокислого калия (добавляя по каплям до полного
острых сальмонеллезов. Шигеллы попадают в почву с               растворения осадка) и делают высев на чашки с висмут-
испражнениями человека.                                         сульфитным агаром и средой Плоскирева. Параллельно
      Все представители рода Salmonella являются потенциально   оставшийся осадок заливают желчным бульоном. Посевы
патогенными для человека, вызывая заболевания, разнообразные    помещают в термостат при температуре 37°С. Для выявления
по клинической картине (от тяжелых сальмонеллезов до            сальмонелл из желчного бульона через 5 и 20 ч делают высев на
бактерионосительства) и продолжительности. Часто заболевание    дифференциально-диагностические       среды.      Дальнейшая
протекает легко, что приводит к быстрому выздоровлению,         идентификация сальмонелл и шигелл ведется по обычной схеме.
поэтому больные не обращаются к врачу, оставаясь вне поля             Для обнаружения сальмонелл и шигелл можно
зрения санитарно-эпидемиологической службы и становясь          непосредственно исходную почвенную суспензию фильтровать
возможными носителями сальмонелл. Конечно, человек              через мембранные фильтры, затем их переносят на
выделяет бактерий значительно меньше по сравнению с             дифференциально-диагностические среды для подращивания.
животными, но выделяемые им сальмонеллы адаптированы к его            Патогенные     микроорганизмы     в     почве    можно
организму и потому эпидемически более опасны. Для               обнаруживать, используя иммунолюминесцентный метод,
определения сальмонелл в почве могут быть использованы два      постановку биопробы (при выявлении клостридий столбняка и
метода: посев в среду накопления и метод коагуляции с           ботулизма).
последующим высевом на дифференциально-диагностические                Санитарно-микробиологическая     оценка     почвы.   Ее
среды.                                                          производят по комплексу показателей: общее количество
      Первый метод более простой: для обнаружения               сапрофитных микроорганизмов и наличие санитарно-по-
сальмонелл в подготовленную почвенную суспензию вносят          казательных микробов - БГКП, перфрингенс и др. Большая
ингредиенты магниевой среды «М» (из расчета объема              численность      почвенной      сапрофитной      микрофлоры
суспензии), инкубируют при температуре 37°С в течение 18-20ч.   свидетельствует об органическом загрязнении почвы, при
Затем делают высев на висмут-сульфитную среду (обычно 3-5       микробной       контаминации      преобладают      санитарно-
чашек). Идентификация выросших колоний проводится по            показательные микроорганизмы. В естественных условиях, как
                                                                правило, микробное и органическое загрязнение происходит

                                                          71    72