Биотехнология. Коростелева Н.И - 38 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

АГАУ | Барнаул

Составители: 

Рубрика: 

38
Для переноса генов в клетки растений широко используются
Тi-плазмиды почвенных агробактерий (Agrobacteria). Последние
могут заражать двудольные растения и вызывать образование
опухолей – корончатых галлов. Опухоли состоят из дедиффе-
ренцированных клеток, интенсивно делящихся и растущих в
месте заражения. В бактериальных клетках Ti-плазмиды (англ.
«tumor inducing» – индуцирующие опухоли) реплицируются ав-
тономно; их кольцевая ДНК длиной около 200 т.н.п. Чаще всего
встречаются Ti-плазмиды, кодирующие аминокислоты нопалин
или октопин. После заражения фрагмент ДНК Ti-плазмиды вы-
страивается в ДНК растительной клетки, изменяя ее метаболизм
и заставляя синтезировать вещества (опины), необходимые бак-
терии. Этот фрагмент ДНК Ti-плазмиды назван т-ДНК (транс-
формирующая ДНК); его длина примерно 23 т.н.п. На концах
т-ДНК находятся прямые повторы (25 н.п.), которые (наряду с
vir-областью) необходимы для вырезания ее из состава плазми-
ды и интеграции в геном растений.
Природная Ti-плазмида очень велика, и после трансформа-
ции растений клетки не будут способны к регенерации. В на-
стоящее время конструируют производные Ti-плазмиды, в кото-
рых вставляют регуляторный участок Т-области, а вместо ее
структурных генов вшивают структурную часть гена, который
надо ввести в растение. Такие гены безвредны для растения. На
основе Ti-плазмиды сконструированы промежуточный и бинар-
ный векторы.
Перспективным вектором считаются Ri-плазмиды (англ. «root
inducinq» – индуцирующий корни) из бактерий (A. rhizodenes),
вызывающих усиленное образование корешков при заражении
бактерий. В отличие от Ti-плазмид Ri-плазмиды служат естест-
венными безвредными векторами, так как трансформированные с
их помощью растительные клетки сохраняют способность к мор-
фогенезу и к регенерации здоровых растений.
В качестве векторов растений используются ДНК-содержа-
щие вирусы (их только 1-2% от вирусов, инфицирующих расте-
ния). Это содержащий одноцепочечную ДНК вирус золотой мо-
заики фасоли (ВЗМФ) или вирус полосатой кукурузы, а также
вирус с двухцепочечной ДНК – вирус мозаики цветной капус-
ты (ВМЦК), поражающий в основном растения семейства кре-
стоцветных. Фитовирусы отличаются высокой копийностью 
    Для переноса генов в клетки растений широко используются
Тi-плазмиды почвенных агробактерий (Agrobacteria). Последние
могут заражать двудольные растения и вызывать образование
опухолей – корончатых галлов. Опухоли состоят из дедиффе-
ренцированных клеток, интенсивно делящихся и растущих в
месте заражения. В бактериальных клетках Ti-плазмиды (англ.
«tumor inducing» – индуцирующие опухоли) реплицируются ав-
тономно; их кольцевая ДНК длиной около 200 т.н.п. Чаще всего
встречаются Ti-плазмиды, кодирующие аминокислоты нопалин
или октопин. После заражения фрагмент ДНК Ti-плазмиды вы-
страивается в ДНК растительной клетки, изменяя ее метаболизм
и заставляя синтезировать вещества (опины), необходимые бак-
терии. Этот фрагмент ДНК Ti-плазмиды назван т-ДНК (транс-
формирующая ДНК); его длина примерно 23 т.н.п. На концах
т-ДНК находятся прямые повторы (25 н.п.), которые (наряду с
vir-областью) необходимы для вырезания ее из состава плазми-
ды и интеграции в геном растений.
    Природная Ti-плазмида очень велика, и после трансформа-
ции растений клетки не будут способны к регенерации. В на-
стоящее время конструируют производные Ti-плазмиды, в кото-
рых вставляют регуляторный участок Т-области, а вместо ее
структурных генов вшивают структурную часть гена, который
надо ввести в растение. Такие гены безвредны для растения. На
основе Ti-плазмиды сконструированы промежуточный и бинар-
ный векторы.
    Перспективным вектором считаются Ri-плазмиды (англ. «root
inducinq» – индуцирующий корни) из бактерий (A. rhizodenes),
вызывающих усиленное образование корешков при заражении
бактерий. В отличие от Ti-плазмид Ri-плазмиды служат естест-
венными безвредными векторами, так как трансформированные с
их помощью растительные клетки сохраняют способность к мор-
фогенезу и к регенерации здоровых растений.
    В качестве векторов растений используются ДНК-содержа-
щие вирусы (их только 1-2% от вирусов, инфицирующих расте-
ния). Это содержащий одноцепочечную ДНК вирус золотой мо-
заики фасоли (ВЗМФ) или вирус полосатой кукурузы, а также
вирус с двухцепочечной ДНК – вирус мозаики цветной капус-
ты (ВМЦК), поражающий в основном растения семейства кре-
стоцветных. Фитовирусы отличаются высокой копийностью

                             38

Страницы