Биотехнология органических кислот и белковых препаратов. Муратова Е.И - 23 стр.

UptoLike

ледяная (98…99,8 %). Для получения уксусной эссенции или ледяной уксусной кислоты уксусную кислоту концентрируют с
помощью ректификации,
Кроме перечисленных товарных форм в кулинарии широко используют фруктовый уксус. Фруктовый уксус отличается
от обычного уникальностью лечебных свойств и удивительным набором компонентов, так как в него практически без потерь
переходят все полезные вещества фруктов (макро- и микроэлементы, витамины, ферменты, аминокислоты, уксусная,
пропионовая, молочная, лимонная и другие кислоты). В технологию получения фруктового уксуса входят стадии
измельчения сырья, приготовления сусла, спиртового брожения, фильтрации (процеживания) бражки, уксуснокислого
брожения. Оптимальной для роста уксуснокислых бактерий считается температура 26…28 °С. Через два-три месяца
жизнедеятельности уксуснокислых бактерий винный спирт превращается в уксус, который отличается натуральной
мутностью и ароматом фруктов.
Порядок выполнения работы
В а р и а н т 1. ПОЛУЧЕНИЕ УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ
НА СИНТЕТИЧЕСКОЙ СРЕДЕ ЛОЙЦЯНСКОЙ
1. В колбы вместимостью 500 мл внести 50 мл указанной среды.
2. Определите рН среды при помощи рН-метра. Для этого прибор через адаптер подключите к сети переменного тока
220 В. Электроды (сравнения, вспомогательный и термокомпенсации) промыть дистиллированной водой, осушить и
погрузить в исследуемую жидкость. Уровень погружения электрода в жидкость, для бесперебойной работы рН-метра,
должен быть выше 16 мм. Включить прибор нажатием кнопки On/Off, а кнопкой mV/рН выбрать режим измерения рН.
Через 30…60 с снять показания и выключить прибор кнопкой On/Off.
3. Колбы со средами, закрыв ватной пробкой и бумажным колпачком, простерилизовать в автоклаве в течение 30 мин при
температуре 121 °С.
4. В охлажденную стерильную среду внести 0,5 мл посевного материала. В среду Лойцянской добавить 2-3 капли 96 %
этилового спирта.
5. Колбы поместить в термостат при 30 °С. В среду Лойцянской ежедневно вносить 2-3 капли 96 % этилового спирта.
6. Первую колбу извлечь из термостата через семь дней.
7. По окончании выращивания Acetobacter aceti описать культуральнные признаки (наличие пленки, ее вид, осадок,
запах и т.д.) и микроскопическую картину (форму, размер бактерий).
8. Отделить накопившуюся биомассу фильтрованием через складчатый фильтр.
9. Определить рН фильтрата при помощи рН-метра.
10. Провести качественную реакцию на уксусную кислоту. Для этого 10 мл фильтрата перенести пипеткой в стакан на
100 мл, добавить однудве капли фенолфталеина и нейтрализовать 10 %-ным раствором соды (до появления устойчивой
бледно-розовой окраски). Если в фильтрате присутствует уксусная кислота, то при добавлении раствора хлорида железа (III),
раствор приобретет красно-бурое окрашивание вследствие образования ацетата железа (III).
11. Определить количество образовавшейся уксусной кислоты в процентах. Для этого 10 мл фильтрата перенести
пипеткой в стакан на 100 мл, добавить 10 мл воды и 2-3 капли фенолфталеина, титровать 0,1 н раствором NaOH до
слаборозовой неисчезающей окраски. Количество образовавшейся уксусной кислоты в процентах вычислить по формуле
(1.1):
,%100
006,0
б
аK
х =
(1.1)
где a – число миллилитров 0,1 н раствора NaOH, пошедшего на титрование; бчисло миллилитров культуральной
жидкости, взятой для титрования; K – поправка щелочи; 0,006 – количество граммов уксусной кислоты, соответствующее 1
мл 0,1 н раствора NaOH.
12. Последующие колбы извлечь из термостата через 14 (21, 28) дней и повторить пп. 7 – 11.
13. Все полученные результаты свести в табл. 1.1.
14. Построить графики зависимости накопления уксусной кислоты и уровня рН от длительности культивирования.
В а р и а н т 2. ПОЛУЧЕНИЕ ФРУКТОВОГО УКСУСА
ИЗ СУХОГО ВИНА
1. Приготовить сухое вино с концентрацией спирта 6…7 % об. Для этого с помощью спиртометра определить
содержание алкоголя и довести его количество до требуемого путем добавления кипяченой водопроводной воды.
2. В колбы вместимостью 500 мл цилиндром налить 100 мл подготовленного сухого вина, внести пипеткой 1 мл
посевного материала и закрыть ватной пробкой.
3. Колбы поместить в термостат при 30 °С. Далее выполнять работу согласно пунктам 6 – 13 варианта 1.