Биотехнология органических кислот и белковых препаратов. Муратова Е.И - 27 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ТГТУ | Тамбов

Составители: 

Рубрика: 

5. Почему для выращивания чайного гриба следует брать кипяченую воду?
6. Какие компоненты питательной среды служат источниками углерода и азота в процессе культивирования чайного
гриба?
7. Какие условия необходимо поддерживать в процессе культивирования биомассы чайного гриба?
8. Чем отличаются методики определения уксусной и молочной кислот в культуральной жидкости?
9. При какой продолжительности культивирования чайного гриба достигаются оптимальные органолептические
показатели?
10. Как взаимосвязаны физико-химические и органолептические показатели настоя чайного гриба?
Лабораторная работа 3
ИЗУЧЕНИЕ ОСОБЕННОСТЕЙ БИОСИНТЕЗА
ЛИМОННОЙ КИСЛОТЫ ПРИ ПОВЕРХНОСТНОМ
КУЛЬТИВИРОВАНИИ МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ГРИБОВ
Цель работы: изучить влияние состава питательной среды на биосинтез лимонной кислоты при культивировании
микроскопических грибов Aspergillus niger.
Теоретические предпосылки
Лимонная кислота СН
2
СООН–СОНСООН–СН
2
СООН является трехосновной оксикислотой, кристаллизующейся из
водных растворов с одной молекулой воды в виде бесцветных прозрачных кристаллов. Производство лимонной кислоты
основано на культивировании микроскопических грибов Aspergillus niger, которые сбраживают сахара питательной среды,
образуя лимонную кислоту. В качестве углеродсодержащего компонента питательной среды используют мелассу,
содержащую 45…48 % сахарозы. Кроме того, в состав питательной среды входят нитрат аммония, моно- или дифосфат
калия, сульфат магния, цинка, железа.
Культивирование продуцента проводят поверхностным или глубинным способом. Производство лимонной кислоты
включает следующие основные технологические стадии: получение посевного материала, подготовку мелассы к
сбраживанию, сбраживание растворов мелассы в лимонную кислоту с последующим отделением мицелия, выделение из
сброженных растворов лимонной кислоты и получение ее в кристаллическом виде.
В лабораторной работе изучается влияние концентрации мелассы в питательной среде на процесс накопления лимонной
кислоты микроскопическими грибами. Биохимическая активность культуры Aspergillus niger оценивается гравиметрическим
(по массе мицеллиальной пленки), титриметрическим (по объему щелочи, пошедшей на титрование культуральной
жидкости) и потенциометрическим (по изменению кислотности среды в процессе культивирования) методами.
Для оценки биохимической активности используют следующие показатели:
1) содержание лимонной кислоты в 1 мл культуральной жидкости
,
007,0
b
а
х = (3.1)
где а – число мл 0,1 н раствора NаОН, пошедшего на титрование; b – число мл культуральной жидкости, взятой на
титрование; 0,007 – количество грамм лимонной кислоты, соответствующее 1 мл 0,1 н раствора NаОН;
2) выход лимонной кислоты в процентах от исходного сахара
,%100
кж
с
xV
y =
(3.2)
где V
кж
– объем культуральной жидкости, мл; с – содержание сахара в исходной питательной среде, г;
3) продуцирующая способность культуры
,П
кж
m
хV
=
(3.3)
где т – масса мицеллиальной пленки, г;
4) рН исходной питательной среды и культуральной жидкости.
Лабораторная работа проводится на двух занятиях: на первом – готовят питательную среду, измеряют ее кислотность,
стерилизуют и засевают культурой гриба Aspergillus niger; на втором – анализируют биохимическую активность продуцента,
определяя рН культуральной жидкости, массу мицеллиальной пленки и объем пошедшего на титрование лимонной кислоты
раствора едкого натра.
Порядок выполнения работы
1. Приготовить 100 мл жидкой питательной среды в конической колбе из компонентов по одному из вариантов,
указанных в табл. 3.1.

Страницы