Биотехнология органических кислот и белковых препаратов. Муратова Е.И - 28 стр.

UptoLike

ВУЗ: 

ТГТУ | Тамбов

Составители: 

Рубрика: 

3.1. Состав питательной среды
Варианты
Компоненты питательной среды
1 2 3 4 5
Меласса, г (содержание сахарозы 46 %) 60 50 40 30 20
Раствор солей, мл, концентрацией, мг/мл:
NH
4
NO
3
– 2,3;
KH
2
PO
4
– 0,2;
MgSO
4
⋅7H
2
O – 1,0;
ZnSO
4
– 0,02;
FeSO
4
⋅7H
2
O – 0,06
10
Вода водопроводная, мл 60 65 70 75 80
Взвесить на технических весах пустой стаканчик, поместить в него необходимое количество мелассы, навеску
перенести в коническую колбу, смывая остатки мелассы со стенок и дна стаканчика указанным в таблице количеством воды,
затем добавить в колбу мерным цилиндром 10 мл раствора солей.
2. Измерить кислотность питательной среды рН-метром. Для этого включить прибор в сеть; промыть электроды
дистиллированной водой, просушить фильтровальной бумагой и опустить в стаканчик с питательной средой; установить
переключатель вида компенсации (КТ-Р) в положение "КТ"; переключатель вида измерения (рН, °С, mV) установить в
положение "рН"; после установления показаний считать результат измерения.
3. Перелить питательную среду из стаканчика рН-метра в коническую колбу; закрыть колбу ватной пробкой и
бумажным колпачком, подписать и стерилизовать 15 мин при 1 атм. в автоклаве.
4. Внести в остывшую до температуры 30 °С питательную среду посевной материал. Для этого в пробирку с
культурой Aspergillus niger на сусло-агаре залить стерильную воду до верхнего края косяка. Проводя бактериологической
петлей по поверхности косяка, перенести в воду часть темного конидиального слоя. Полученную водную суспензию
конидий перемешать, отобрать стерильной пипеткой 0,5 мл и вылить в колбу со стерильной средой. Поместить колбу в
термостат с температурой 30 °С на семь суток.
5. Изучить биохимическую активность культуры. Для этого отделить мицелий от культуральной жидкости
фильтрованием и определить массу мицеллиальной пленки взвешиванием на технических весах. Измерить объем
культуральной жидкости мерным цилиндром, измерить рН культуральной жидкости рН-метром. Определить содержание
лимонной кислоты в культуральной жидкости путем титрования щелочью: поместить пипеткой 2 мл фильтрата в
коническую колбу; добавить мерным цилиндром 200 мл дистиллированной воды, 3-4 капли фенолфталеина и титровать из
бюретки 0,1 н NaOH до слаборозовой окраски.
6. Рассчитать содержание лимонной кислоты в 1 мл культуральной жидкости по формуле (3.1), выход лимонной
кислоты в процентах от исходного сахара по формуле (3.2) и продуцирующую способность культуры по формуле (3.3).
Построить графические зависимости этих показателей от концентрации сахарозы в питательной среде.
7. Результаты измерений и расчетов свести в табл. 3.2.
3.2. Экспериментальные и расчетные показатели
Варианты
Биохимические показатели
1 2 3 4 5
Количество сахара в питательной среде, г/л
рН питательной среды
рН культуральной жидкости
Объем культуральной жидкости, мл
Объем 0,1 н NaOH на титрование, мл
Масса мицеллиальной пленки, г
Содержание лимонной кислоты в 1 мл
культуральной жидкости, г/мл
Выход лимонной кислоты от исходного
сахара, %
Продуцирующая способность, г/г

Страницы