ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
органическими растворителями или высаливанием. Если принять содержание сухих веществ в культуре гриба за 100 %, то
при экстракции 22…23 % их переходят в раствор, на долю ферментов приходится 3…5 %.
В лабораторной работе предлагается исследовать влияние состава и влажности питательной среды на уровень
накопления амилолитического фермента в процессе выращивания культуры микроскопического гриба Aspergillus oryzae на
твердой сыпучей среде, состоящей из пшеничных отрубей и древесных опилок.
Амилаза катализирует реакцию гидролиза крахмала и относится к ферментам группы гидролаз. Расщепление крахмала
происходит по кислородным мостикам, соединяющим молекулы глюкозы. Под действием
α-амилазы из крахмала образуется дисахарид мальтоза, состоящий из двух остатков глюкозы, поэтому процесс этот
называется осахариванием крахмала. И он лежит в основе приготовления сусла из зерна и картофеля в спиртовом
производстве, приготовлении затора в пивоварении.
В качестве промежуточных продуктов при гидролизе крахмала образуются соединения разного молекулярного веса,
называемые декстринами. На первых стадиях гидролиза получаются декстрины с высокой степенью полимеризации
(35…40), с йодом они дают синее окрашивание, как и крахмал. По мере дальнейшего гидролиза молекулярный вес
декстринов снижается и от йода они начинают окрашиваться в фиолетовый, затем темно-бурый, красноватый цвет и,
наконец, перестает реагировать с
йодом. Это свойство положено в основу определения количества фермента амилазы в культуре гриба или ферментном
препарате. Выделить фермент в чистом виде и определить его количество – очень сложная задача. Удобнее определить
количество фермента по активности его воздействия на соответствующий субстрат.
В данной работе активность амилазы определяется по количеству крахмала, расщепленного до неокрашивающихся
йодом декстринов за единицу времени при строго определенных условиях.
Лабораторная работа проводится на двух занятиях: на первом готовят питательную среду, засевают и выращивают
культуру гриба; на втором – экстрагируют ферменты и анализируют активность амилазы в вытяжке.
З А Н Я Т И Е 1
Группа студентов делится на две бригады, Одна изучает влияние состава, а вторая – влияние влажности питательной
среды на уровень накопления амилолитических ферментов.
ПОРЯДОК ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ
1. Определить влажность сырьевых компонентов – пшеничных отрубей и опилок на приборе ПИВИ.
Просушить бумажные конверты (16 × 16 см) при 160 °С в течение трех минут и охладить в эксикаторе. Взвесить пустой
пакет, заполнить отрубями или опилками и взвесить навеску 5 г. Распределить материал тонкими слоем и сушить при 160
°С
шесть минут, охладить в эксикаторе и взвесить.
2. Рассчитать влажность по формуле
%100
ba
ca
X
−
−
= , (4.1)
где а – масса конверта с влажной навеской, г; с – масса конверта с высушенной навеской, г; b – масса пустого конверта, г.
3. Среднюю величину влажности пшеничных отрубей и опилок рассчитать по результатам двух параллельных опытов и
внести в табл. 4.1.
4.1. Результаты определения влажности
Масса навески,
г
№
опыта
Наименовани
е среды
влаж
ной
высу-
шенной
Количеств
о
испаренно
й влаги, г
Влажност
ь,
W, %
Средняя
влажност
ь W
ср
, %
1 Пшеничные
отруби
2 Пшеничные
отруби
3 Опилки
4 Опилки
4. Приготовить шесть вариантов питательной среды по 20 г, отличающихся соотношением пшеничных отрубей и
древесных опилок, которые участвуют в разрыхлении среды, и регулировании содержания крахмала, согласно табл. 4.2.
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 28
- 29
- 30
- 31
- 32
- …
- следующая ›
- последняя »
