ВУЗ:
Составители:
Рубрика:
– 11 –
2.2. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè ñâÿçûâàíèÿ êîìïëåìåíòà
 ÐÑÊ èñïîëüçóþò Àà êîêñèåëë Áåðíåòà, ïðåäñòàâëÿþùèé
ñîáîé ëèîôèëèçèðîâàííûå êîêñèåëëû, âûðàùåííûå â æåëòî÷íûõ
ìåøêàõ êóðèíûõ ýìáðèîíîâ, èíàêòèâèðîâàííûå ôîðìàëèíîì è
î÷èùåííûå îò áàëëàñòíûõ âåùåñòâ. Äàííûé ïðåïàðàò ïîçâîëÿåò
âûÿâëÿòü êîìïëåìåíòñâÿçûâàþùèå ÀÒ ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà.
 äåíü ïîñòàíîâêè ÐÑÊ ñóõîé Àà ðàñòâîðÿþò â ôèçèîëîãè-
÷åñêîì ðàñòâîðå â îáúåìå, óêàçàííîì íà ýòèêåòêå àìïóëû. Ðåàê-
öèþ ìîæíî ïðîâîäèòü â îáúåìå 0,5 ìë, 1 ìë è 1,25 ìë ïðè 4
°Ñ â
òå÷åíèå 18 ÷ èëè ïðè 37
°Ñ â òå÷åíèå 1 ÷.
Ïåðâîíà÷àëüíî âûïîëíÿþò òèòðîâàíèå êîìïëåìåíòà.  êà÷å-
ñòâå åãî èñòî÷íèêà èñïîëüçóþò ñûâîðîòêó êðîâè ìîðñêèõ ñâè-
íîê, âçÿòóþ íàêàíóíå îïûòà, à òàêæå ïðèìåíÿþò çàìîðîæåí-
íûé ïðè 20
°Ñ èëè ñóõîé êîìïëåìåíò. Èñõîäíûì ïðè òèòðîâàíèè
êîìïëåìåíòà ÿâëÿåòñÿ åãî ðàçâåäåíèå 1 : 10. Â ðÿä ïðîáèðîê îòìå-
ðèâàþò ìèêðîïèïåòêîé ðàçëè÷íûå äîçû ðàçâåäåííîãî êîìïëå-
ìåíòà ñ èíòåðâàëîì 0,01 ìë, îò 0,02 ìë äî 0,15—0,2 ìë. Îáúåì
æèäêîñòè â êàæäîé ïðîáèðêå äîâîäÿò äî 0,75 ìë ñ ïðèáàâëåíè-
åì 0,9%-ãî ðàñòâîðà íàòðèÿ õëîðèäà. Ïîñëå ýòîãî äîáàâëÿþò ïî
0,5 ìë ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìû, ïðîáèðêè âñòðÿõèâàþò è ñòàâÿò
â òåðìîñòàò íà 30 ìèí ïðè 37
°Ñ, çàòåì ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàò.
Çà 1 åäèíèöó êîìïëåìåíòà óñëîâíî ïðèíèìàþò åãî êîëè÷å-
ñòâî, êîòîðîå âûçûâàåò ïîëíûé ãåìîëèç, à çà 1 ïîëíóþ åãî
åäèíèöó — êîëè÷åñòâî êîìïëåìåíòà âî âòîðîé ïðîáèðêå ñ ïîë-
íûì ãåìîëèçîì. Åñëè ÐÑÊ ïðîâîäÿò ïðè 4
°Ñ, òî â îïûò áåðóò
2 ïîëíûõ åäèíèöû êîìïëåìåíòà â ðàçâåäåíèè 1 : 10, à åñëè ïðè
37 °Ñ, òî áåðóò 1 ïîëíóþ åäèíèöó.
Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìû ýðèòðîöèòû áà-
ðàíà îòìûâàþò 3 ðàçà ïî 10 ìèí 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëî-
ðèäà ïðè 1500 îá/ìèí. Èç îñàäêà ýðèòðîöèòîâ áåðóò 0,3 ìë è
äîâîäÿò 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëîðèäà äî 19 ìë. Ê ýòîé âçâå-
ñè ïðèáàâëÿþò 10 ìë ãåìîëèòè÷åñêîé ñûâîðîòêè 1 : 1000, êîòî-
ðóþ ãîòîâÿò ñëåäóþùèì îáðàçîì: 0,1 ìë èñõîäíîé ãåìîëèòè÷åñ-
êîé ñûâîðîòêè ðàçâîäÿò 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëîðèäà ìåòî-
äîì ïîñëåäîâàòåëüíûõ äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé. Ïåðåä èñïîëü-
çîâàíèåì ãåìîëèòè÷åñêóþ ñèñòåìó âûäåðæèâàþò ïðè 37
°Ñ â òåð-
ìîñòàòå â òå÷åíèå 30 ìèí.
2.2. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè ñâÿçûâàíèÿ êîìïëåìåíòà  ÐÑÊ èñïîëüçóþò Àà êîêñèåëë Áåðíåòà, ïðåäñòàâëÿþùèé ñîáîé ëèîôèëèçèðîâàííûå êîêñèåëëû, âûðàùåííûå â æåëòî÷íûõ ìåøêàõ êóðèíûõ ýìáðèîíîâ, èíàêòèâèðîâàííûå ôîðìàëèíîì è î÷èùåííûå îò áàëëàñòíûõ âåùåñòâ. Äàííûé ïðåïàðàò ïîçâîëÿåò âûÿâëÿòü êîìïëåìåíòñâÿçûâàþùèå ÀÒ ê êîêñèåëëàì Áåðíåòà.  äåíü ïîñòàíîâêè ÐÑÊ ñóõîé Àà ðàñòâîðÿþò â ôèçèîëîãè- ÷åñêîì ðàñòâîðå â îáúåìå, óêàçàííîì íà ýòèêåòêå àìïóëû. Ðåàê- öèþ ìîæíî ïðîâîäèòü â îáúåìå 0,5 ìë, 1 ìë è 1,25 ìë ïðè 4 °Ñ â òå÷åíèå 18 ÷ èëè ïðè 37 °Ñ â òå÷åíèå 1 ÷. Ïåðâîíà÷àëüíî âûïîëíÿþò òèòðîâàíèå êîìïëåìåíòà.  êà÷å- ñòâå åãî èñòî÷íèêà èñïîëüçóþò ñûâîðîòêó êðîâè ìîðñêèõ ñâè- íîê, âçÿòóþ íàêàíóíå îïûòà, à òàêæå ïðèìåíÿþò çàìîðîæåí- íûé ïðè 20 °Ñ èëè ñóõîé êîìïëåìåíò. Èñõîäíûì ïðè òèòðîâàíèè êîìïëåìåíòà ÿâëÿåòñÿ åãî ðàçâåäåíèå 1 : 10.  ðÿä ïðîáèðîê îòìå- ðèâàþò ìèêðîïèïåòêîé ðàçëè÷íûå äîçû ðàçâåäåííîãî êîìïëå- ìåíòà ñ èíòåðâàëîì 0,01 ìë, îò 0,02 ìë äî 0,15—0,2 ìë. Îáúåì æèäêîñòè â êàæäîé ïðîáèðêå äîâîäÿò äî 0,75 ìë ñ ïðèáàâëåíè- åì 0,9%-ãî ðàñòâîðà íàòðèÿ õëîðèäà. Ïîñëå ýòîãî äîáàâëÿþò ïî 0,5 ìë ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìû, ïðîáèðêè âñòðÿõèâàþò è ñòàâÿò â òåðìîñòàò íà 30 ìèí ïðè 37 °Ñ, çàòåì ó÷èòûâàþò ðåçóëüòàò. Çà 1 åäèíèöó êîìïëåìåíòà óñëîâíî ïðèíèìàþò åãî êîëè÷å- ñòâî, êîòîðîå âûçûâàåò ïîëíûé ãåìîëèç, à çà 1 ïîëíóþ åãî åäèíèöó — êîëè÷åñòâî êîìïëåìåíòà âî âòîðîé ïðîáèðêå ñ ïîë- íûì ãåìîëèçîì. Åñëè ÐÑÊ ïðîâîäÿò ïðè 4 °Ñ, òî â îïûò áåðóò 2 ïîëíûõ åäèíèöû êîìïëåìåíòà â ðàçâåäåíèè 1 : 10, à åñëè ïðè 37 °Ñ, òî áåðóò 1 ïîëíóþ åäèíèöó. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ãåìîëèòè÷åñêîé ñèñòåìû ýðèòðîöèòû áà- ðàíà îòìûâàþò 3 ðàçà ïî 10 ìèí 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëî- ðèäà ïðè 1500 îá/ìèí. Èç îñàäêà ýðèòðîöèòîâ áåðóò 0,3 ìë è äîâîäÿò 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëîðèäà äî 19 ìë. Ê ýòîé âçâå- ñè ïðèáàâëÿþò 10 ìë ãåìîëèòè÷åñêîé ñûâîðîòêè 1 : 1000, êîòî- ðóþ ãîòîâÿò ñëåäóþùèì îáðàçîì: 0,1 ìë èñõîäíîé ãåìîëèòè÷åñ- êîé ñûâîðîòêè ðàçâîäÿò 0,9%-ì ðàñòâîðîì íàòðèÿ õëîðèäà ìåòî- äîì ïîñëåäîâàòåëüíûõ äåñÿòèêðàòíûõ ðàçâåäåíèé. Ïåðåä èñïîëü- çîâàíèåì ãåìîëèòè÷åñêóþ ñèñòåìó âûäåðæèâàþò ïðè 37 °Ñ â òåð- ìîñòàòå â òå÷åíèå 30 ìèí. – 11 –
Страницы
- « первая
- ‹ предыдущая
- …
- 9
- 10
- 11
- 12
- 13
- …
- следующая ›
- последняя »