Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 48 стр.

времени свободных аминогрупп в процессе гидролиза
казеина в присутствии трипсина.                                      Оборудование.    Колбы    вместимостью    25   мл;   мерные
                                                                     цилиндры вместимостью 10 мл; пипетки на 2 мл; стаканчики
  Лабораторная работа: Исследование действия липазы                  для титрования; термостат (38—40 °С); кипящая водяная
                   поджелудочной железы                              баня; микробюретки; бюретки.
                                                                     Реактивы. 1. Молоко, разбавленное в соотношении 1:10. 2. 0,1
      Жиры, или триацилглицерины, практически не всасы-
                                                                     % раствор фенолфталеина в растворе 60 % этилового спирта.
ваются в пищеварительном тракте. В тонкой кишке про-
                                                                     3. 0,01 % раствор гидроксида натрия.
исходит      их     гидролиз,     который        катализируется
                                                                     Материал для исследования. Приготовление вытяжки          из
липолитическими         ферментами,            вырабатываемыми
                                                                     поджелудочной железы. Поджелудочную железу сразу после
поджелудочной железой. Существует несколько типов
                                                                     забоя животного измельчают на мясорубке, добавляют 3—4
панкреатических липаз. Одни из них специфичны в
                                                                     мл желчи и растирают в фарфоровой ступке стеклянным
отношении         эфирных       связей     в     а     -положении
                                                                     пестиком в течение 30 мин. Смесь переносят в посуду из
триацилглицерина, а другие гидролизуют связи в β -
                                                                     темного стекла и заливают 4 объемами водного глицерина (2
положении.        Полный        гидролиз       триацилглицеринов
                                                                     части глицерина + 1 часть воды). Добавляют несколько
происходит постадийно: сначала ферментами атакуются
                                                                     кристаллов тимола и оставляют на 2—3 дня. Затем смесь
α- и α1-связи, а затем более медленно гидролизуются β -
                                                                     фильтруют через марлю. Экстракт хранят в холодильнике (в
моноацилглицерины.     Конечные      продукты        переваривания
                                                                     этих условиях активность сохраняется в течение 1 года).
(глицерин, высшие жирные кислоты, а также ди- и
                                                                     Перед употреблением вытяжку разводят 4 объемами воды
моноацилглицерины) всасываются в стенки кишечника.
                                                                     (рН раствора 7,0-8,0).
      В процессе переваривания и всасывания липидов важ-
                                                                           В качестве источника липазы могут служить таблетки
ную роль играют желчные кислоты. Они эмульгируют
                                                                     панкреатина, которые смачивают водой и после удаления
жиры, активируют липазу и обеспечивают всасывание
нерастворимых продуктов переваривания.