Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 46 стр.

 номер пробирки,             в который реакция на крахмал               гидролиза пептидных связей в тех точках полипептидной
 отрицательна.                                                          цепи белка, где расположены остатки аргинина и лизина.
         Деля     степень    разведения     контрольной пробы, в        Наличие положительного заряда в аминокислотном ра-
 которой реакция с иодом отрицательна, на степень разве-                дикале, расположенном рядом с пептндной связью, является
 дения       соответствующих        проб       с       исследуемыми     причиной специфического ускорения трипсином гидролиза
 эффекторами, вычисляют, во сколько раз активатор (NaCl.)               именно       тех    пептидных       связей,    которые     образованы
 или ингибитор (CuS04) стимулирует или тормозит действие                указанными аминокислотами:
 амилазы слюны.                                                                Строение трипсина хорошо изучено. Этот белок с
                                                                        относительной молекулярной массой, равной 23 950,
                Ферментативный гидролиз белков                          состоит из 228 аминокислотных остатков. Первичная
      Степень распада белка при действии на него фер-                   структура          трипсина      полностью     выяснена,    и   многое
ментов (псптидогидролаз) можно проследить по увеличению                 известно о его вторичной и третичной структурах. В
количества       α - аминных групп, освобождающихся при                 частности,         важнейшую       роль    в    его   каталитической
гидролизе пептидных связей белка в его растворе. Чем                    активности играет активный центр, в состав которого
больше освободилось α-аминных групп, тем соответственна                 входят радикалы серина (183-й аминокислотный остаток в
больше     распалось        пептидных     связей   и    тем    выше,    молекуле) и гистидина (29-й и 46-й аминокислотные
следовательно, степень деструкции белковой молекулы.                    остатки       в     молекуле).    Именно       благодаря   сочетанию
      Лабораторная работа: Накопление свободных                         перечисленных аминокислотных остатков в молекуле трип-
          α – аминогрупп в процессе гидролиза белка                     сина     и    осуществляется         гидролиз     пептидной     связи.
                       при участии трипсина.                            Механизм этого процесса выяснен.
                                                                        Оборудование: Фотоэлектроколориметр; термостат; баня
      Трипсин          представляет           собой           пептид-
                                                                        водяная;
пептидогидролазу       и     специфически     ускоряет        реакцию
                                                                        пробирки стеклянные (10 шт.); штатив лабораторный;