Методические указания для самостоятельной подготовки к лабораторным занятиям по биологической химии. Пластинина З.А - 45 стр.

      На основании полученных данных строят график           Реактивы: слюна       неразбавленная      профильтрованная;
зависимости активности амилазы от величины рН и находят      крахмал (0,5%-ный); хлорид натрия (1%-ный); сульфат меди
на нем оптимальное значение рН фермента, для чего на оси     (1%-ный); иод (0,3%-ный) в иодиде калия (З %-ном).
ординат откладывают значения Еф,      на оси    абсцисс -
значение рН.                                                 Ход работы: В штативах      располагают    тремя рядами 36
                                                             пробирок и нумеруют их в каждом ряду. Во все пробирки
                                                             вливают из бюретки по 1 мл воды, а затем в первые пробирки
     Лабораторная работа: Действие активаторов и             каждого ряда - по 1 мл профильтрованной неразбавленной
               ингибиторов на амилазу слюны                  слюны.    Содержимое пробирок хорошо перемешивают.
                                                             Далее в каждом ряду 1 мл смеси из пробирки 1 переносят в
      Большое влияние на активность ферментов оказывает
                                                             пробирку 2, перемешивают, снова набирают 1 мл смеси и
присутствие в растворе некоторых химических соединений.
                                                             переносят в пробирку 3 и т.д. вплоть до пробирки 12, из
Одни из них повышают активность ферментов (активаторы),
                                                             которой после перемешивания выливают 1 мл жидкости.
другие понижают (ингибиторы).      К активаторам относят
                                                                   Во все пробирки первого ряда наливают по 1 мл
многие ионы Na+, Mg+2, Mn+2, Co+2 и др. Из ингибиторов
                                                             воды (контрольный ряд); в пробирки второго ряда - по 1 мл
ферментов известны соли синильной кислоты, угнетающие
                                                             раствора хлорида натрия и в пробирки третьего ряда - по 1 мл
некоторые геминовые ферменты, моноиодуксусная кислота,
                                                             раствора сульфата меди. Далее во все пробирки приливают
приостанавливающая спиртовое и молочнокислое брожение,
                                                             из бюретки по 2     мл    раствора крахмала в следующем
фосфорорганические         соединения,         необратимо
                                                             порядке: сначала в первые номера всех рядов, затем во
инактивирующие ряд эстераз и др.
                                                             вторые и т.д. Содержимое пробирок перемешивают и ставят

Оборудование:     Термостат на 40°С; бюретки прямые с        штативы с пробирками в термостат при 40оC на 15 мин.

краном на 50 мл (2 шт.); пипетки с одной меткой на 1 мл (4         По охлаждении в каждую из них добавляют по капле

шт.);2 штатива лабораторных с пробирками;                     раствора иода в иодиде калия и отмечают в каждом ряду